2.2. Методы исследований

Культивирование дрожжей проводили на жидкой питательной среде на качалке со скоростью перемешивания 120 об/мин при температуре 12-14°С.

Приготовление разводки чистой культуры дрожжей осуществляли методом накопления биомассы путем последовательных пересевов на жидкую питательную среду в соответствии с "Технологической инструкцией по производству и контролю качества Советского шампанского" [116].

Разводку дрожжей отделяли от культуральной жидкости путем отстаивания и декантирования или центрифугированием при 3,0 тыс.об/мин в течение 10-15 минут.

Иммобилизацию клеток включением их в гель альгината кальция осуществляли по методике, описанной в литературе [21]. Сухой альгинат натрия
смешивали с водопроводной водой, перемешивали до получения однородного геля и обеспложивали путем пастеризации на водяной бане при температуре 75±5 °С в течение 20-25 минут.

Дрожжи, отделенные от культуральной жидкости, смешивали с гелем альгината натрия в соотношении не более 1:10. Полученную смесь прокапывали в стерильный раствор СаСЬ при помощи бюретки с диаметром выходного отверстия 2,0 мм со скоростью 1,0 дм3/час. Объемное соотношение носитель: осадитель - 1:3 [97]. Полученные при этом гранулы диаметром 3-4мм выдерживались в растворе- осадителе в течение 1,5±0,5 часов, после чего промывались стерильной дистиллированной водой и хранились в физиологическом растворе при температуре 4±1 °С.

Определение физиологического состояния клеток дрожжей в гранулах и их концентрацию осуществляли при микроскопировании после растворения гранул в растворе ИагНРОд^НгО с массовой концентрацией 60 г/дм3 и подсчетом в счетной камере.

Вторичное брожение проводили в лабораторных условиях — в колбах Фрейденрейха, в производственных — в шампанских бутылках с производственной укупоркой при температуре 12-14 °С.

Аналитические и микробиологические определения проводили в 3-5 повторностях с использованием стандартных и общепринятых физико- химических и микробиологических методов, изложенных в отраслевой и научно-технической литературе.

Определение массовой концентрации этилового спирта - методом отгона по ГОСТ 13191-73;

Определение массовой концентрации сахара - методом Бертрана и Лена- Эйнона по ГОСТ 13192-73;

Определение массовой концентрации титруемых кислот - методом прямого титрования по ГОСТ 14252-73;

Определение массовой концентрации летучих кислот - методом титрования поГОСТ 13193-73;

Определение общего и свободного диоксида серы - методом йодометрического титрования по ГОСТ 14351-73;

Определение водородного показателя pH - потенциометрическим методом ("Сборник технологических инструкций ...

по винодельческой промышленности", 1985);

Определение массовой концентрации фенольных веществ (в сумме) - колориметрическим методом с реактивом Фолина-Чокальтеу (в модификации Сейдер, Датунашвили, 1975; "Методы технохимического и микробиологического контроля в виноделии", 1980);

Определение массовой концентрации белка - по методу Шактерле-Поллак (цит. по Любаревич и сотр., 1976);

Определение массовой концентрации кальция - методом перманганато­метрического титрования по РД 10-04-05-31-16-90 ("Определение массовой концентрации кальция в виноматериалах и винах"; свидетельство N 16 от 26.11.90);

Определение массовой концентрации винной кислоты - по методу МОВВ ("Методы технохимического и микробиологического контроля в виноделии", 1980);

Определение массовой концентрации общего экстракта - по ГОСТ 14251-75;

Определение избыточного давления при шампанизации - по ГОСТ 12258 -79;

Определение мутности - согласно методике, описанной в "Методах технохимического и микробиологического контроля в виноделии" (1980);

Хроматические характеристики определяли по методу Сюдро [25]

Испытания виноматериалов и кюве к помутнениям физико-химического характера согласно методикам ("Методы технохимического и микробиологического контроля в виноделии", 1980);

Определение количества клеток и их физиологического состояния - методом посева и подсчета клеток при прямом микроскопировании [23];

Определение кинематической вязкости гелей альгинатов натрия осуществляли вискозиметрическим методом (вискозиметр по ГОСТ 10028-81). Расчет проводили по формуле:

9,807

■К-Т, где

V — кинематическая вязкость, мм2/с; g — ускорение свободного падения в месте измерения, м/с2; К — постоянная вискозиметра; Т— время истечения геля, с.

Экономический коэффициент расчитывали по формуле [101].

V Лх

Y =—, где

As

Y — экономический коэффициент; Ах — увеличение биомассы; As — потребленный субстрат.

Метаболический коэффициент расчитывали по формуле [101].

ds 1 dp 1

q* = ; qP , где

dt x dt x

qs, qP—удельная скорость метаболизма или физиологическая активность; х — биомасса; t — время; s —потребленный субстрат; р —образовавшийся продукт.

Полученные экспериментальные данные обрабатывались с применением методов математической статистики на IBM- 386 с помощью стандартных пакетов по обработке данных “Microsoft Excel 5.0” и “Coplot”.

<< | >>
Источник: СОГОЯН КАРИНЭ РУДОЛЬФОВНА. БИОХИМИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ИММОБИЛИЗОВАННЫХ ДРОЖЖЕЙ В ПРОИЗВОДСТВЕ ИГРИСТЫХ ВИН БУТЫЛОЧНЫМ СПОСОБОМ. Диссертация на соискание ученой степени кандидата технических наук. Ялта, 1998. 1998

Скачать оригинал источника

Еще по теме 2.2. Методы исследований:

  1. ЧАСТЬ II. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ГЛАВА 3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
  2. Затолока П.А.. Методы исследования слуха: учеб.-метод. пособие / П.А. Затолока – Минск: БГМУ,2009. – с., 2009
  3. ЛАБОРАТОРНЫЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ. ИССЛЕДОВАНИЕ МОКРОТЫ
  4. Методы исследования Клинические методы исследования
  5. Методы исследования пищевода
  6. Биохимические методы исследования
  7. Дополнительные методы исследования
  8. Методы исследования личности
  9. 4 Классификация методов психологического исследования.
  10. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
  11. Специальные методы исследования
  12. СУБЪЕКТИВНЫЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ СЛУХА
  13. ОБЪЕКТИВНЫЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ СЛУХА
  14. Методы исследования
  15. 21. Акустические методы исследования
  16. БИОХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
  17. Электрофизиологические методы исследования
  18. КОПРОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
  19. Специальные методы исследования
- Акушерство и гинекология - Анатомия - Биология - Болезни уха, горла и носа - Валеология - Ветеринария - Внутренние болезни - Восстановительная медицина - Гастроэнтерология и гепатология - Гематология - Геронтология, гериатрия - Гигиена и санэпидконтроль - Дерматология - Диетология - Иммунология и аллергология - Интенсивная терапия, анестезиология и реанимация - Инфекционные заболевания - Информационные технологии в медицине - История медицины - Кардиология - Клинические методы диагностики - Кожные и венерические болезни - Медицина катастроф - Медицинская паразитология - Медицинская этика - Медицинские приборы - Наследственные болезни - Неврология и нейрохирургия - Нефрология - Онкология - Организация системы здравоохранения - Оториноларингология - Офтальмология - Патофизиология - Педиатрия - Психология - Стоматология - Судебная медицина - Токсикология - Физиология -