Количественное определение суммы флавоноидов в препаратах (настое и настойке) полыни эстрагон

Jifln. количественного определения суммы флавоноидов в настойке полыни эстрагон исходя из методики количественного определения, разработанной в отношении травы полыни эстрагон нами использован метод дифференциальной спектрофотометрии (глава 4, рис.

Изучены УФ-спектры исходного раствора (рис. 29, кривая поглощения 1) и комплекса с А1С1з (рис. 29, кривая поглощения 2). В качестве аналитической длины волны использован максимум поглощения при 404 нм (рис. 29, кривая поглощения 3), обусловленный комплексом эстрагонозида и других флавоноидов с AICI3. В качестве стандартного образца в методике количественного определения флавоноидов целесообразно использовать ГСО рутин, имеющий максимум поглощения (412 нм) (рис. 29, кривая поглощения 4), близкий с таковым эстрагонозида.

По результатам количественной оценки содержание суммы флавоноидов в пяти различных сериях настойки, полученной из сырья травы полыни эстрагон, заложенной на хранение в течение 3-х лет, составило от 0,22 % до 0,31 % (табл. 22). Следовательно, в качестве нижнего предела можно рекомендовать показатель 0,2 %.

Таблица 22

Содержание флавоноидов в образцах настойки полыни эстрагон

Результаты проведенных спектрофотометрических исследований исследований позволяют предложить методику количественного определения суммы флавоноидов в траве полыни эстрагон.

Методика количественного определения суммы флавоноидов в настойке полыни эстрагон.

5 мл 70 %-ной настойки тархуна поместили в мерную колбу на 100 мл и довели объем раствора 70 % этиловым спиртом до метки. Получили раствор А.

2 мл раствора А поместили в мерную колбу вместимостью 25 мл, добавляют 2 мл 2 % раствора А1С1з, доводят объем раствора до метки 95 % этиловым спиртом (раствор Б) и через 30 мин измеряют оптическую плотность при длине волны 404 нм. Получили раствор Б в соотношении 1:250. В качестве раствора сравнения используют раствор Б, полученный аналогичным образом, но без добавления AICI3.

Параллельно аналогичным образом проводят опыты с ГСО рутина, используя точную навеску (около 20 мг), растворенную в 50 мл 70 % этилового спирта (см. методику количественного определения суммы флавоноидов в траве полыни эстрагон, глава 4).

Содержание суммы флавоноидов (X) в настойке полыни эстрагон в пересчете на рутин рассчитывают по формуле:

Dxmo xVi х УгхЮОх xl Dxnio х 100x25 х 100

V х 2 х D_o х 50 х 25 V х 2 х D_o х 50 х 25

где D - оптическая плотность испытуемого раствора

Do - оптическая плотность раствора ГСО рутина

V - объем препарата (настойки); мл

Vi - объем раствора А; мл

V₂ - объем раствора Б; мл

m - масса сырья в граммах; то - масса ГСО рутина в граммах;

Метрологические характеристики разработанной методики анализа свидетельствует о том, что ошибка единичного определения в настойке полыни эстрагон составляет + 3,75 % (табл. 23).

Таблица 23

Метрологические характеристики методики количественного определения суммы флавоноидов в настойке полыни эстрагон методом дифференциальной спектрофотометрии

Статистическая обработка данных заключалась в вычислении относительная ошибка и систематической ошибки.

Опыты с добавками ГСО рутина в сырье, извлечение и препарат свидетельствуют о том, что относительная ошибка находится в пределах ошибки единичного определения разработанных методик, что свидетельствует об отсутствии систематической ошибки данных методик.

Разработанная методика количественного анализа настойки полыни эстрагон рекомендована для включения в проект ФСП на новое лекарственное средство “Полыни эстрагон настойка”.

Для количественного определения суммы флавоноидов в настое полыни эстрагон применен разработанный нами метод дифференциальной спектрофотометрии [152].

Количественное определение суммы флавоноидов в настое полыни эстрагон

Для изучения характера кривой поглощения настоя полыни эстрагон нами использован метод прямой спектрофотометрии (рис. 32, кривая

поглощения 2). Из графика видно, что УФ-спектр поглощения настоя является близким к спектру поглощения настойки. Полученные результаты соответствуют данным сравнительного ТСХ-анализа настоя и настойки по качественному составу флавоноидов и фенилпропаноидов (рис. 32).

УФ-спектры растворов настоя и настойки травы полыни эстрагон

------ Опыт 1 (настойка)

—*- Опыт 2 (настой)

—•—Опыт 3 (настой с AICI3)

Рис. 32

Обозначения:

По оси ординат - оптическая плотность;

По оси абсцисс - длина волны, нм.

1 - настока полыни эстрагон на фоне 95 % этилового спирта (1:1000);

2 - настой полыни эстрагон на фоне 95 % этилового спирта (1:500);

3 - настой полыни эстрагон в присутствии А1С1з (1:100) на фоне настоя - дифференциальная кривая поглощения

Результаты проведенных исследований позволяют предложить методику количественного определения суммы флавоноидов в настое полыни эстрагон.

Методика количественного определения суммы флавоноидов в настое полыни эстрагон.

5 мл настоя полыни эстрагон поместили в мерную колбу на 100 мл и довели объем раствора 70 % этиловым спиртом до метки (раствор А).

5 мл раствора А поместили в мерную колбу вместимостью 25 мл, добавляют 2 мл 2 % раствора А1С1з, доводят объем раствора до метки 95 % этиловым спиртом (раствор Б) и через 30 мин измеряют оптическую плотность при длине волны 404 нм. Получили раствор Б в соотношении 1:100. В качестве раствора сравнения используют раствор Б, полученный аналогичным образом, но без добавления АІСІ3.

Содержание суммы флавоноидов (X) в настое полыни эстрагон в пересчете на рутин рассчитывают по формуле:

Dxm₀ xVi х УгхЮОх xl Dxmo х 100x25 х 100

Х= ---------------------------------------------- = ----------------------------------- ,

V х 5 х D_o х 50 х 25 V х 5 х D_o х 50 х 25

где D - оптическая плотность испытуемого раствора

Do - оптическая плотность раствора ГСО рутина

V - объем препарата (настоя); мл

Vi - объем раствора А; мл

V2 - объем раствора Б; мл ш - масса сырья в граммах;

Шо - масса ГСО рутина в граммах;

Результаты количественной оценки содержания суммы флавоноидов в результате проведенной серии эксперимента для настоя составило от 0,103± 0,045%.

Изучена возможность использования метода ГЖХ для идентификации (качественной оценки) основного компонента эфирного масла полыни эстрагон - метилэвгенола.

5.4.