Контролируемая овариальная стимуляция у доноров ооцитов и пациенток с онкологическими заболеваниями

Протокол контролируемой овариальной стимуляции каждому донору подбирали индивидуально, в зависимости от показателей овариального резерва: число антральных фолликулов по УЗИ, уровень АМГ, учитывали количество предыдущих протоколов КОС.

Применяли следующие схемы контролируемой стимуляции суперовуляции:

1. «Длинный» протокол с предварительной десенситизацией гипофиза

препаратами а-ГнРГ с 21 дня цикла и последующим назначением р- ФСГ.

2. Протокол с рекомбинантным ФСГ со 2-3-го дня цикла и применением препаратов - антагонистов Г нРГ, которые назначали после достижения лидирующим фолликулом диаметра 14-16 мм.

3. «Модифицированный» протокол с антиэстрогеном - Клостилбегит.

4. Протокол с корифолитропин-альфа и ант-ГнРГ.

1. При использовании протокола с агонистами Гн-РГ введение препарата аналога Гн-РГ в дозе 0,05мг начинали с середины лютеиновой фазы цикла (таблица 10). После достижения десенситизации аденогипофиза, начиная с 3 дня менструального цикла, донорам назначали препарат рекомбинантного гонадотропина. Стартовую дозу подбирали в зависимости от показателей овариального резерва, подсчета количества антральных фолликулов, также учитывали возраст и результаты предшествующих протоколов стимуляции яичников. Доза р-ФСГ в данном протоколе КОС составляла от 1550 до 2500 МЕ. Количество дней введения лекарственного препарата колебалось от 8 до 12. УЗИ проводили в день начала КОС, далее на 5-6 сутки стимуляции. Триггер финального созревания фолликулов, т.е. овуляторную дозу ХГЧ - назначали после достижения лидирующим фолликулом диаметра 18-20 мм по данным УЗИ. Замену триггера овуляции проводили на препарат а-ГнРГ, при наличии риска развития синдрома гиперстимуляции яичников при проведении КОС с ант-ГнРГ или в модифицированном цикле использованием антиэстрогена.

«Длинный» протокол с А-ГнРГ.

2. Препараты р-ФСГ начинали вводить со 2-3 дня менструального цикла по тем же правилам, как и в «длинном» протоколе. Антагонисты ГнРГ вводили подкожно в суточной дозе 0,25 мг после достижения лидирующим фолликулом диаметра 13-14 мм. Суммарная доза ФСГ в данном протоколе составляла от 1500 до 3400МЕ. Расчет дозы и времени введения триггера овуляции (ХГЧ) производили аналогично таковому в «длинном» протоколе (таблица 11).

3. Модифицированный протокол с антиэстрогеном. С 1—3 дня менструального цикла донорам вводили р-ФСГ, с 6 дня менструального цикла при достижении фолликулами диаметра около 12-13мм, назначали антиэстроген. Суммарная доза р-ФСГ на данный протокол составила от 800 до 2000МЕ (таблица 12).

«Модифицированный» протокол: антиэстроген+р-ФСГ

Клостилбегит (диаметр фолликулов 12-13 мм)

Дни менструального цикла

Триггер

овуляции

Расчет дозы и времени введения триггера овуляции (ХГЧ) производили аналогично предыдущим протоколам контролируемой овариальной стимуляции.

4. Протокол с КФ-альфа производили следующим образом: корифоллитропин-альфа вводили со 2-3 дня менструального цикла. Введение ант-ГнРГ начинали с 5-6 дня КОС в зависимости от динамики ответа на овариальную стимуляцию донора, т.е.

препаратов р-ФСГ до тех пор, пока не было выявлено критериев для введения триггера овуляции (таблица 13).

Таблица 13 - Схема протокола КОС с КФ-альфа и ант-ГнРГ

Схема протокола: ант-ГнРГ+КФ-альфа

Ант-ГнРг

Корифоллитропин-альфа

Р-ФСГ (по показаниям)

Триггер

овуляции

5. В группе онкологических пациенток протокол овариальной стимуляции начинали, как в I, так и во II фазе менструального цикла. Вне зависимости от фазы цикла пациенткам назначали р-ФСГ, затем на 5-6 день КОС - инъекции ант-ГнРГ. Необходимо отметить, что у пациенток с раком молочной железы контролируемую овариальную стимуляцию проводили с включением препаратов ингибитора ароматазы. При наличии противопоказаний к проведению овариальной стимуляции, ооциты у данной группы пациенток были получены на фоне натурального цикла. В период КОС осуществляли УЗ мониторинг числа и скорости роста фолликулов. При необходимости проводили коррекцию дозы препарата гонадотропина. Расчет дозы и времени введения триггера овуляции (ХГЧ) производили аналогично предыдущим протоколам контролируемой овариальной стимуляции (таблица 14).

Таблица 14 - Схема КОС у пациенток с онкологическими заболеваниями во

II фазе цикла

КОС у онкологических пациенток во II фазе менструального цикла

Через 36 часов после инъекции триггера овуляции проводили трансвагинальную пункцию фолликулов с целью аспирации преовуляторных ооцитов. Во II группе в 64,2% (97) случаев в качестве триггера овуляции вводили а-ГнРГ, в III группе замена триггера овуляции на а-ГнРГ отмечена в 16,3% (8) случаев, замену ХГЧ на а-ГнРГ производили с целью профилактики синдрома гиперстимуляции яичников у доноров ооцитов. Трансвагинальную пункцию осуществляли через задний свод влагалища с помощью УЗ аппарата B-K Medical PRO Focus, оснащенного

трансвагинальным датчиком с пункционным адаптером и специальными иглами.

Аспирацию содержимого фолликулов проводили с помощью аспирационного насоса COOK ASPIRATION UNIT. Аспират выливали в чашку Петри диаметром 60 мм и под контролем бинокулярной лупы просматривали его на предмет обнаружения ооцит-кумулюсного комплекса. Если клетка обнаружена, переносили ее в чашку Петри со средой Flushing medium и помещали в инкубатор «Heraus» при постоянных параметрах: температура 37 С, концентрация СО2 в воздухе 5% и влажность 98-100%. В случае, если ооцит не был получен, проводили промывание фолликула специальной средой. Количество вводимой среды не превышало объем фолликула.

2.6