2.2. Методы исследования и профилактики

Для получения информации об уровне здоровья исследованных женщин, для постановки основного и сопутствующих диагнозов выполняли общее клиническое и специальные методы исследования женщин, при этом пользовались клинико-лабораторными, биохимическими, бактериоскопическими,

бактериологическими, иммуноферментным и ультразвуковым методами исследования.

Исследования проводили с учетом положения «О юридических и этических

принципах медико-биологических исследований у человека» (Бюллетень ВАК Министерства образования России, 2002, 3). Выполненная работа не ущемляла права и не подвергала опасности субъектов и соответствовала требованиям биомедицинской этики, утвержденным Всемирной медицинской ассоциацией в 2000 году. Согласно протоколу исследования, критериями включения были: добровольное информированное согласие беременной на участие в исследовании, одноплодная беременность, живой плод.

В работе пользовались терминами из МКБ-10 (см. стр. 3 обзора литературы). ПЭ диагностировали в случае появления во 2-ю половину беременности признаков из триады Цангемейстера (отеки, гипертензия, протеинурия) + симптомы гипертензивной энцефалопатии + судороги, не связанные с неврологическими заболеваниями. Вес детей при рождении конвертировали в центили. Для диагностики у них внутриутробных нарушений роста (ЗВР) пользовались нормограммами, при этом новорожденных с массой тела ниже 10 центиля учитывали как имеющих вес, меньше должного для данного гестационного возраста.

Клинико-лабораторные и биохимические исследования включали общий анализ крови, определение групповой и резус-принадлежности крови, биохимический анализ крови, коагулограмму, общий анализ мочи (в том числе исследование суточной потери белка), пробы Зимницкого и Нечипоренко, определение волчаночного антикоагулянта.

При наличии в анамнезе указаний на патологию внутренних органов, па­циенток консультировали со специалистами соответствующего профиля и обязательно - со стоматологом.

Если в анамнезе женщин имелись сведения о перенесенных ранее цистите и/или эпизодах учащенного болезненного мочеиспускания, а также сведения о пиелонефрите, ПЭ в предыдущую беременность, женщине проводили УЗИ почек, специально исследовали мочу, наличие в мочевом осадке более 6 лейкоцитов в поле зрения микроскопа служило показанием для выполнения теста Нечипоренко,

нормальным числом клеток в 1 мл мочи считали 2000 лейкоцитов и 1000 эритроцитов.

Для идентификации женщин носительниц ВА в I-II триместрах беременности забиралась венозная кровь и тестировалась в соответствии с методикой, описанной в монографии (Р.Н. Степановой «Беременность и аберрации иммунитета», М., Спутник Плюс, 2013, с. 81-82).

Для определения концентрации РАРР-А в сыворотке крови беременной использовали планшетный иммуноферментный анализатор Stat Fax 2100 (Awareness Technology, США) и набор реагентов «ИФА-РАРР-А» (ООО «Компания Алкор Био», Санкт-Петербург). Приобретение реагентов для исследования стоило в ценах 2012 г 10500 рублей. В наборе использован «сэндвич» - вариант твердофазного иммуноферментного анализа.

После определения концентраций РАРР-А построены калибровочные графики зависимости оптических плотностей от концентрации РАРР-А (мЕд/мл) в калибровочных пробах, по которым определяли содержание протеина в аналитах. Расчеты степени риска в пренатальном скрининге указывались в МоМ (кратное медианы - multiple of median) и вычислялись по формуле: МоМ=измеренная концентрация РАРР-А / медиана РАРР-А.

Давление крови измеряли механическим тонометром Microlife, Швейцария. Среднее артериальное давление (САД) вычисляли по формуле: САД=(систолическое АД + 2диастолических АД)/3 (Ф. Ариас, 1989). Данные конвертировали в МоМ.

Для проведения roll-over теста беременной в положении лежа на левом боку измеряли АД на правой руке с интервалом в 5 минут до постоянной базового значения диастолического артериального давления (ДАД). Когда ДАД становится постоянным, женщину просили повернуться на спину и немедленно измеряли АД, через пять минут измерение повторяли. Повышение ДАД при повороте тела на 20 мм рт.

Допплеросонографические измерения в первом триместре (11-13 недель) проводили на ультразвуковых аппаратах ALOKA 3500 (Япония) и SonoAce 6000C (Medison, Корея) конвексными датчиками 3,5 МГц в положении женщины на спине. Для визуализации МАр использовали импульсный режим и ЦДК, при этом окно ЦДК размещали на боковых стенках матки на уровне внутреннего зева в области проекции a.uterinae. После идентификации МАр контрольный допплеровский объем 2 мм помещали в просвет каждой артерии и регистрировали на КСК в МАр наличие/отсутствие диастолической выемки, при получении трех одинаковых КСК рассчитывали среднее значение ПИ для левой и правой МАр.

Ультразвуковое исследование во втором и третьем триместрах беременности осуществлялось с применением стандартных методик эхографии трансабдоминального сканирования и допплерометрического исследования кровотока в МАр.

Для беременных из группы высокого риска развития ПЭ в I триместре разрабатывали индивидуальную превентивную стратегию, включающую оптимизацию антенатальной помощи, назначение психоседативных средств растительного происхождения, физкультуру, модификацию стиля жизни, лечение ЭГЗ и гинекологической патологии, а также назначение в 8-10 и 18-20 недель ацетилсалициловой кислоты 125 мг/сутки и дипиридамола 150 мг/сутки.

Статистический анализ

С учетом оценки воздействия фактора на исход беременности и родов выполнялись исследования типа: «случай-контроль» и проспективное (продольное). В работе проводился анализ качественных и количественных данных. При описании взаимоотношений качественных переменных использовали определение относительного риска (обозначаемого RR - Relative Risk) и соотношение шансов (обозначение Odds Ratio - OR); для анализа связей количественных переменных использовали регрессионный анализ.

Основные расчеты велись по таблице сопряженности дихотомических признаков.

В таблице: a - число женщин, имеющих факторы риска и заболевших ПЭ,

b - число женщин без факторов риска, заболевших ПЭ;

с - число женщин, имеющих факторы риска и не заболевших ПЭ;

d - число женщин без факторов риска, не заболевших ПЭ;

q - общее число исследованных женщин.

В продольных исследованиях для определения отношения вероятности наступления ПЭ в одной группе беременных к аналогичной вероятности в другой рассчитывали RR= (a∕(a+b))∕(c∕(c+d)).

При использовании дизайна по типу случай-контроль оценивали также шансы - количество раз, когда женщина останется здоровой к числу раз, когда она заболеет. Шансы заболеть в группе, подвергшейся воздействию фактора риска, составляют a∕b, а в группе без этих факторов - c∕d. Чтобы оценить, во сколько раз шансы заболеть в группе риска выше, чем шансы заболеть в группе без факторов риска вычисляли OR= a?d∕b?c.

Для определения возможного диапазона значений, в котором может находиться популяционное, а не выборочное значение RR или OR, рассчитывался 95% доверительный интервал (95% CI). При RR (OR)>>1 отмечается сильная положительная связь фактора риска с развитием ПЭ, при RR (OR) = 1 - отсутствие связи, при RR (OR)