<<
>>

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Необходимость многофакторного изучения патологических состояний человека в зависимости от влияния внешнесредовых факторов (в том числе производственных), диктуется современными сложными экологическими условиями.

Республика Башкортостан является одним из высоко развитых промышленных регинов РФ, при этом на небольшой территории сконцентрировано основное число нефтехимических и нефтеперерабатывающих преприятий.

Учитывая, »гго производственная среда является частью окружающей, принцип моделирования, являющийся теоретической основой общей биологии, позволяет изучать воздействия производственных факторов на работающего в качестве модели взаимодействия организм-среда. При этом производственные условия являются фактором высокого риска развития- профессиональных заболеваний.

Учитывая многофакторность воздействия агентов окружающей среды на организм человека, не всегда представляется возможным выявить конкретную причину болезни. В этой связи профессиональные заболевания, могут служить моделью в поиске маркеров предрасположенности и устойчивости к неблагоприятному влиянию факторов внешней среды (Пай с соавт., 2003). Известно, что профессиональные заболевания при одних и тех же условиях труда и продолжительности стажа возникают нс у всех работающих (Кузьмина, 2001; Измеров, 2001). Развитие заболевания определяется не только повреждающим действием химических веществ, но и особенностями организма. Разные индивидуумы могут сохранять устойчивость или обнаруживать повышенную чувствительность к поступающим в организм токсичным веществам. Следует отметить, что профессиональные патологии (в данном случае токсический гепатит) - это полиэтиологическне заболевания, обусловленные сложным взаимодействием различных генетических и средовых факторов. В генетической детерминации развития профессиональной патологии или адаптации организма к вредным условиям промышленной среды и резистентности принимают участие гены ферментов биотрансформации ксенобиотиков, степень проявления которых зависит от совокупности всех генов человека.

При этом генетические особенности индивидуумов могут быть фактором, предрасполагающим к развитию у чувствительных людей различных патологических изменений (Спицын, 1990; Баранов с соавт., 2000; Гичев, 2001).

Целью исследования явилась оценка предрасположенности рабочих, подвергающихся воздействию химического фактора производственной среды к развитию профессиональных заболеваний на основе изучения полиморфизма генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков.

В качестве модельного объекта для клинических исследований были выбраны работающие производства- ОАО «Салаватнефтеоргсинтез»: твердого топлива (гептила) (N=202) и этилбензола-стирола (N=243) (г. Салават). Комплексное клиническое обследование рабочих с использованием функциональных и лабораторных методов проведено врачами медсанчасти и специалистами Уфимского НИИ медицины труда и экологии человека (Гимранова Г.Г., Чурмантаева С.Х.). Условия труда работающих перечисленных производств были оценены совместно с Каримовой Л.К., Мулдашевой Н.А.

Контрольную группу составили 335 практически здоровых лиц, жителей г. Салават и г. Уфа. Основным критерием отбора в контрольную группу служило отсутствие профессионального контакта с вредными химическими веществами.' Средний возраст индивидов контрольной группы составил 45,12±10,57 лет. Группы обследованных рабочих и контроля были сопоставимы по возрасту, полу и этнической принадлежности.

Выделение ДЫК из лимфоцитов периферической крови работающих и лиц контрольной группы осуществляли стандартным методом фенольно­хлороформной экстракции (Mathew, 1984). Дслсционный полиморфизм генов GSTMI и GSTTI, изучали методом полимеразной цепной реакции синтеза

ДИК (ПЦР). Полиморфизм генов: 7-го экзона (A4889G) гена CYP1A1, 1-го экзона (С188Т) гена CYP2D6, 5* области (С1091Т) гена CYP2E1, двух полиморфных локусов 3-го (Т337С) i«4-ro(A415G) экзонов гена ЕРНХ1,5- го экзона (АЗ 13G) гена GSTPI, транзиций С481Т, G590A, G857A гена NAT2 проводили методом ПЦР и ПДРФ-анализа (полиморфизм длин рестрикционных фрагментов).

Продукты амплификации анализировались элскгрофорстичсски в ПААГ после окрашивания гелей бромистым этидием с последующей визуализацией ДНК-фрагментов в УФ-свете.

В основу формирования различных групп рабочих положено наличие отдельных патологических признаков у обследованных или их сочетаний с учетом характера действующего фактора и особенностей вызываемой им патологии. Были выделены четыре группы рабочих. В первую вошли 73 больных с профессиональным токсическим* гепатитом, во вторую - 163 больных группы “риска” по развитию токсического гепатита, в третью - 115 рабочих с соматическими заболеваниями и четвертую составили 94 практически здоровых работающих.

Для определения генотипов, ассоциированных с чувствительностью рабочих проводили сравнение общей выборки рабочих с контрольной, группой индивидов, не подвергающихся профессиональному воздействию токсических веществ: Для идентификации генотипов, ассоциированных с предрасположенностью- к профессиональному токсическому поражению печени, проводили сравнение между больными токсическим гепатитом, «группой риска» и здоровыми рабочими. Для определения генотипов ассоциированных с общей заболеваемостью среди рабочих изученных производств, проводили сравнение группы рабочих с соматическими патологиями со здоровыми.

При сравнительном анализе полиморфных вариантов генов 1 фазы биотрансформации ксенобиотиков (CYPIAI, CYP2D6, CYP2E1, ЕРНХ1) в общей выборке рабочих и в контрольной группе, существенных различий в распределении аллелей и генотипов выявлено не было.

Изучение полиморфных вариантов генов 2 фазы метаболизма ксенобиотиков показало существенное снижение частоты делеции по гену GSTM1 до 35,24% в группе рабочих по сравнению с 55,28% в контроле (Х2=29,45; р=0,0005). Было установлено значительное повышение частоты гетерозиготного генотипа по гену-GSTP1 в общей группе рабочих до 32,04% по сравнению с 24,32% в контрольной группе (х2=4,74; р=0,03). По гену NAT2 определено повышение частоты нормального генотипа NAT2*4/*4 в производственной группе до 16,06% при сравнении с контрольной выборкой; где на> долю этого генотипа приходилось 5,74% (х2=14,07; р=0,0008).

Тенденция к накоплению в группе рабочих определенного аллеля (генотипа) может свидетельствовать об адаптивном ответе производственной группы на- воздействие внешнесредовых факторов. Причину отбора рабочих с определенными вариантами можно связать со следующими факторами. Во* первых, возможно, лица; имеющие в генотипе, делению гена GSTMI, нормальный- генотип гена GSTPI и мутантные генотипы по гену NAT2, не устраивались на работу во вредные цеха ввиду повышенной заболеваемости. Во-вторых, нельзя исключить, что в результате периодического медицинского осмотра происходил отсев рабочих с данными полиморфными вариантами по причине повышенной заболеваемости. По гену GSTT1 нс было обнаружено различий в распределении делеции между группами рабочих и контроля.

При анализе*полиморфизма генов ФБК у рабочих в зависимости-от выраженности ответных реакций организма работающего на неблагоприятный эффект воздействия наиболее существенные результаты были получены по генам CYP1A1 и ЕРНХ1 гетерозиготные генотипы, которых ассоциируются с риском развития токсического гепатита, тогда как нормальные генотипы эти* генов ассоциируются с устойчивостью организма к влиянию токсичных веществ производств гептила и ЭБС. По гену NAT2 показано, что комбинация генотипов NAT2*4/*7 является вариантом повышенного риска развития токсического гепатита у рабочих изученных производств. По генам CYP2D6, CYP2E1, GSTTI, GSTMI существенных различий в группах рабочих с учетом статуса здоровья в распределении аллелей и генотипов не выявлено.

При изучении полиморфизма генов ФБК у рабочих в зависимости от активности ферментов печени и уровня билирубина установлено, что у рабочих с высокими показателями билирубина (более 20,5 мкмоль/л) генотип Tyr/His встречался с частотой 54,17% против 40,93% у рабочих с нормальным уровнем билирубина (8,5-20,5 мкмоль/л). Вариант His/His был обнаружен в 2,08% у рабочих с высоким уровнем билирубина, у 2,06% работающих с высоким АЛТ (более 33 ед/л), у 4,55% рабочих с высокими значениями ACT (более 32 сд/л), тогда как у рабочих с нормальным уровнем билирубина и нормальной активностью ACT (5-31 ед/л) данный генотип не встречался (%2=5,99, р=0,005; х2=4,79, р=0,01; х,2=24,65, р=0,001, соответственно). По остальным генам ферментов биотрансформации ксенобиотиков существенных различий в распределении генотипов в зависимости от показателей ферментативной активности и уровня билирубина у рабочих изученных производств показано не было.

В результате проведенного исследования было установлено, что генотипами повышенного риска развития токсического поражения печени у рабочих изученных производств являются вварианты: lle/Val гена CYPIAI (OR-5,78), Tyr/His гена- ЕРНХ1, (OR=2,54), фенотип медленного метаболизатора микросомальной эпоксидгидролазы, (OR=2,42), *4/*7 гена NAT2, (OR=8,34), комбинация генотипов генов CYPIAI/CYP2EI (IleVal/CICl), (OR=5,81), комбинация генотипов генов CYP1A1/CYP2EI/CYP2D6 (11с11с/С1С2/СТ), (OR=10,20), комбинация

генотипов генов CYPIAI/CYP2EI/CYP2D6 (IleVal/CICl/CC), (OR-10,20), комбинация генотипов генов CYPIAI/CYP2EI/CYP2D6 и фенотипа микросомальной эпоксидгидролазы (IleVal/CICl/CT/N), (OR= 10,34), комбинация фенотипов микросомальной эпоксидгидролазы и ариламин N- ацетилтрасферазы 2 (медленный метаболизатор ЕРНХ1/медленный ацетилятор NAT2), (OR=3,23), ассоциированные с развитием токсического гепатита.

Маркерами устойчивости рабочих к влиянию вредных факторов производств гептила и этилбензола-стирола и развитию токсического гепатита являются варианты: генотип 11е/11е гена CYPIAI (OR=0,17), генотип Туг/Туг гена EPHXl (OR=0,37), фенотип нормального метаболизатора гена (OR=0,44), комбинация генотипов генов CYPIA1/CYP2E1 (llellc/ClCl), (OR-0,28), комбинация генотипов генов CYP1A1/CYP2E1/CYP2D6 и фенотипа микросомальной эпоксидгидролазы (Ilelle/CICl/CC/N), (OR=0,32), комбинация генотипов генов GSTMI/GSTTl и фенотипа микросомальной эпоксидгидролазы (+/+/N) (OR=0,46), ассоциированные с резистентностью.

Таким образом, в результате изучения полиморфизма генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков у рабочих производств гептила и этилбензола-стирола нами выявлены генетические маркеры риска, ассоциированные с предрасположенностью к токсическому гепатиту и маркеры устойчивости рабочих к влиянию вредных веществ.гепатотропного действия. Наиболее выраженные генетические изменения (наибольшее количество достоверных различий в распределении полиморфных вариантов генов ФБК) было получено у больных токсическим гепатитом по сравнению с группой здоровых рабочих. Больные «группы риска» и рабочие с соматической- патологией- занимают промежуточное положение в распределении нормальных и мутантных вариантов изученных генных систем мезжду двумя крайними положениями: группой профессиональных больных и здоровых. Изучение предрасположенности к развитию профессиональных заболеваний гепато-билиарной системы на- основе молекулярно-генетического анализа генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков («биомаркеров чувствительности») на молекулярном уровне позволяет установить причинную связь действующего производственного химического фактора с возникающими патологическими изменениями в организме рабочих. В этой связи варианты генетического полиморфизма ферментов биотрапсформацин ксенобиотиков, ассоциированные с предрасположенностью к развитию токсическому поражению печени являются основанием для выделения в группе работающих, лиц обладающих повышенной чувствительностью к воздействию производственных химических факторов.

Использование молекулярно-генетического метода позволит выявлять повышенный индивидуальный риск развития заболеваний гепато-билиарной системы у индивидов, поступающих на работу в производства, где возможно воздействие гепатотропных ядов, а также для формирования в донозологический период «групп риска» по развитию токсического гепатита. Лицам с наліпием маркеров риска токсического поражения печени целесообразно рекомендовать работать на менее вредных производствах.

Таким образом, применение молекулярно-генетического подхода с целью оценки предрасположенности к развитию заболеваний, вызванных химическим фактором является перпективным, актуальным и важным в решении основных проблем экологической генетики и медецины труда.

114

ВЫВОДЫ

1. У рабочих производств гептила и этилбензола-стирола доказано отсутствие различий в распределении аллелей и генотипов генов 1 фазы биотрансформации ксенобиотиков (CYPIAI, CYP2D6, CYP2E1, ЕРНХ1) по сравнению с лицами контрольной группы, нс имеющими профессионального контакта с химическими веществами.

2. У рабочих производств гептила и этилбензола-стирола наблюдается повышение частоты нормального генотипа гена GSTMI, гетерозиготного генотипа гена GSTPI и комбинации *4/*4 гена NAT2 по сравнению с контрольной группой.

3. У больных профессиональным токсическим гепатитом установлены генетические маркеры предрасположенности организма к развитию профессиональных заболеваний по вариантам lle/Val гена CYP1A1 (OR=5,78), Tyr/His гена EPHXI (OR=2,79); комбинации *4/*7 гснаЛС47'2 (OR=8,34); а так же медленного фенотипа микросомальной эпоксидгидролазы (OR—2,42); комбинации генотипов lleVal/CICl генов CYPIAI и CYP2EI (OR-5,81); комбинации медленных фенотипов микросомальной эпоксидгидролазы и ариламин N-ацетилтрасферазы 2 (OR=3,23) по сравнению со здоровыми рабочими.

4. У рабочих производств гептила и этилбензола-стирола установлены варианты устойчивости организма к действию гспатототропных ядов: нормальный генотип (Ile/Ile) гена CYP1AI (OR=0,17); нормальный генотип (Туг/Туг) гена EPHXI (OR=0,37); а так же нормальный фенотип микросомальной эпоксидгидролазы (OR=0,44); комбинация нормальных генотипов (Ilelle/ClCl) генов CYPIAI и CYP2EI (OR=0,28); комбинация нормальных генотипов (IlcIle/CICl/CC/N) генов CYPIAI, CYP2E1, CYP2D6 и нормального фенотипа микросомальной эпоксидгидролазы (OR=0,32); сочетание нормальных генотипов (+/+/N) генов GSTMl, GSTT1 и нормального фенотипа микросомальной эпоксидгидролазы (OR=0,46).

5. Изучение роли генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков в формировании ответных реакций организма на воздействие химических факторов производственной и окружающей среды является перспективным научным направлением в целях обоснования критериев индивидуального риска развития профессиональных и общих заболеваний рабочих, а также при решении вопросов профилактики, медицинского контроля и рационального трудоустройства лиц, имеющих определенный генотип по генам ферментов биотрансформации ксенобиотиков.

Практические рекомендации

1. С целью профилактики профессиональных поражений печени и предупреждения прогрессирования заболевания рекомендуется внедрение генотипирования полиморфизма генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков у рабочих, контактирующих с гепатотропными ядами, по полиморфным вариантам генов CYPIAI, ЕРНХ1, GSTMI, NAT2.

2. Лицам с наличием маркеров предрасположенности по изученным полиморфным системам целесообразно рекомендовать работу без профессиональной токсической нагрузки.

3. При выявлении информативных вариантов полиморфизма изученных генов требуется диспансеризация рабочих с проведением лечебно- профилактических мероприятий, адаптированных к конкретному рабочему, с обязательным включением мембрано- и гепатоиротекторов, энтеросорбентов и антиоксидантов.

116

<< | >>
Источник: Макарова Ольга Владимировна. ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНОВ ФЕРМЕНТОВ БИОТРАНСФОРМАЦИИ КСЕНОБИОТИКОВ У РАБОЧИХ НЕФТЕХИМИЧЕСКИХ ПРОИЗВОДСТВ. Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук. Уфа - 2004. 2004

Скачать оригинал источника

Еще по теме ЗАКЛЮЧЕНИЕ:

  1. Заключение
  2. ЗАКЛЮЧЕНИЕ
  3. Заключение
  4. ЗАКЛЮЧЕНИЕ
  5. ЗАКЛЮЧЕНИЕ
  6. Заключение: от понимания к действию
  7. ЗАКЛЮЧЕНИЕ
  8. Параграф седьмой. О заключениях по двигательным действиям [мозга] и по тому, что с ними сходно, как [например], сон и бодрствование
  9. Параграф тринадцатый. Заключения по состоянию частей тела, которые являются как бы ветвями мозга, каковы, например, глаза, язык, лицо, проходы язычка2, миндалины, шея и нервы
  10. Параграф четырнадцатый. Заключения по соучастию органов, с которыми соучаствует мозг и к которым он близок
  11. Параграф десятый. Способы заключения о состоянии желудка
  12. Заключение
  13. Заключение
  14. Заключение
  15. 3.5. Заключение
  16. ЗАКЛЮЧЕНИЕ
  17. Патоморфологическое заключение
  18. ЗАКЛЮЧЕНИЕ
  19. Заключение
  20. Оформление заключения (постановления) военно­врачебной комиссии. Медицинская документация
- Акушерство и гинекология - Анатомия - Андрология - Биология - Болезни уха, горла и носа - Валеология - Ветеринария - Внутренние болезни - Военно-полевая медицина - Восстановительная медицина - Гастроэнтерология и гепатология - Гематология - Геронтология, гериатрия - Гигиена и санэпидконтроль - Дерматология - Диетология - Здравоохранение - Иммунология и аллергология - Интенсивная терапия, анестезиология и реанимация - Инфекционные заболевания - Информационные технологии в медицине - История медицины - Кардиология - Клинические методы диагностики - Кожные и венерические болезни - Комплементарная медицина - Лучевая диагностика, лучевая терапия - Маммология - Медицина катастроф - Медицинская паразитология - Медицинская этика - Медицинские приборы - Медицинское право - Наследственные болезни - Неврология и нейрохирургия - Нефрология - Онкология - Организация системы здравоохранения - Оториноларингология - Офтальмология - Патофизиология - Педиатрия - Приборы медицинского назначения - Психиатрия - Психология - Пульмонология - Стоматология - Судебная медицина - Токсикология - Травматология - Фармакология и фармацевтика - Физиология - Фтизиатрия - Хирургия - Эмбриология и гистология - Эпидемиология -