ВОЗМОЖНОСТИ ДИАГНОСТИКИ.
Совершенно очевидно, что определение в крови эндотоксина может свидетельствовать о генерализации инфекционного процесса. Используемый для этого самый чувствительный метод – это лимулюс амебоцитный лизатный тест (ЛАЛ – тест).Он основывается на открытии того, что у рачка Limulus polyphemus инъекция грамотрицательных бактерий ведет к диссеминированному внутрисосудистому свертыванию.
Исследования показали, что свертывание гемолимфы обусловливает один компонент бактерии – эндотоксин., Чтобы вызвать этот эффект, достаточно 1 пг очищенного эндотоксина. Нужные для активации процессов свертывания факторы можно найти в гранулах, имеющихся в специализированных кровяных клетках рачка Limulus polyphemus – амебоцитах. С применением лизата этих клеток разработан простой тест свертывания для измерения количества эндотоксина. Присутствие эндотоксина вызывает каскадную реакцию в клетках, в которой участвуют три протеазы. Эта реакция активизирует энзим, который расщепляет клеточный протеин на 3 полипептидные цепочки, 2 из этих цепочек отвечают за гелирование лимфы. Этот процесс полностью аналогичен человеческому каскаду свертывания. В лаборатории содержание эндотоксина определяется фотометрически, добавляя к энзиму хромогенный субстрат, в качестве которого используют связанный с дипептидом n-нитроанилин. Цветная реакция происходит, если энзим отщепляет фрагмент n-нитроанилина.Показано, что определяемые очень низкие концентрации эндотоксина порядка 10 пг/мл в плазме могут свидетельствовать о грамотрицательном сепсисе. Результаты исследований показали, что наличие и уровень эндотоксинемии коррелируют с клиническим исходом. Исследователи полагают, что этот тест можно использовать при сепсисе для оценки прогноза. Выявлено, что начальные концентрации в плазме < 25, 25 – 700, 700 – 10 000 пг/мл и > 10 000 пг/мл кореллируют соответственно с летальностью 0, 14, 27 и 86 %.
При этом титр эндотоксина более 700 пг/мл статистически достоверно соответствует развитию шока.Однако ,ряд фактов осложняет интерпретацию концентрации эндотоксина в плазме. Различные грамотрицательные бактерии имеют неодинаковое количество ЛПС и высвобождают различные количества эндотоксина в результате отторжения фрагментов клеточной мембраны во время фазы роста. Последняя особенность четко обозначена у менингококковых штаммов. Кроме того, эндотоксины различных грамотрицательных бактерий имеют различную активность по отношению к тесту, что не всегда коррелирует с биологическим действием. Это означает, что абсолютные концентрации не всегда точно отражают степени тяжести грамотрицательного сепсиса. Обнаружение концентраций эндотоксина в плазме может быть использовано для ранней индикации развития сепсиса. Отрицательный результат не исключает, что эндотоксины и медиаторы уже оказали свое действие и в крови больше не обнаруживаются. Часто эндотоксин при самом тяжелом сепсисе обнаруживается в циркуляторном русле только в течение короткого времени.
Несмотря на это при обнаружении эндотоксина в человеческой плазме, хромогенный ЛАЛ-тест оказывается, , единственным клинически практикуемым методом индикации и количественной оценки эндотоксина в плазме.
В клинической практике для оценки эндотоксикоза применяется целый ряд методов, позволяющих косвенно судить о его тяжести. Существуют специальные методы индикации токсичных веществ, определяющих степень эндотоксикоза. К ним относят биотестирование на мышах, резистентность у которых снижается предварительной блокадой ретикулоэндотелиальной системы; метод гемокультуры, основанный на изменении свойств лейкоцитов под действием токсина; метод определения токсичности плазмы с помощью реакции, которая основана на гибели парамеций (простейших класса инфузорий) под влиянием токсического фактора; лейкоцитарный индекс интоксикации; метод определения уровня средних молекул. Им придается определяющая роль в формировании эндотоксемии и сепсиса. В последние годы для диагностики сепсиса и эндотоксикоза предлагается определения уровня прокальцитонина. Однако к сожалению ,все предлагаемые методы носят только вспомогательный характер и не имеют самостоятельного значения для диагностики сепсиса.
Еще по теме ВОЗМОЖНОСТИ ДИАГНОСТИКИ.:
- Диагностика ХВГ
- Особенности формирования и ранней диагностики аутоиммунного тиреоидита у детей в условиях повышенной антропогенной нагрузки
- 12.7. Диагностика лекарственных аллергий
- ВОЗМОЖНОСТИ ДИАГНОСТИКИ.
- ТУБЕРКУЛИНО-ДИАГНОСТИКА
- Инструментальная диагностика.
- 1.Дифференциальная диагностика кист поджелудочной железы.
- Диагностика
- Билет 12. Проблемы психолого-педагогической диагностики.
- 5.9. Пренатальная и преимплантационная диагностика муковисцидоза.
- ОБЩИЕ ПРИНЦИПЫ ДИАГНОСТИКИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ ОПУХОЛЕЙ
- Методы диагностики
- 112. Методы диагностики герпетических кератитов
- Глава 8 Экстраорбитальные и внебульбарные патологические процессы глазницы с точки зрения возможностей ультразвуковой диагностики.
- Клинические особенности и диагностика рака почек
- Использование компьютерной электромиографии для ранней и дифференциальной диагностики экстрапирамидных заболеваний
- Диагностика
- Диагностика доброкачественных опухолей и опухолевидных образований яичников