<<
>>

2. Результаты исследования и их обсуждение

Представители мукоровых грибов известны как синтетики кароти­ноидов, в том числе р -каротина (провитамина А) и ликопина, на­шедшего применение в качестве пищевого красителя ( Бехтерева,1973 Hesseftine, AnJerson, 1957; Js#?r ьіаЯ., 1958; p/esse^«’ne, I960).

В СССР предложены и внедрены в производство штаммы гетеротал- личного гриба £>Р. trispora. _ продуцента -каротина, разработа­ны технологические схемы получения кормового препарата £> -кароти­на с использованием этого гриба ( Скрябин,Кузнецов,Глухова,1966; Скрябин, Кузнецов,Глухова, Ерошин,196б; Бехтерева,1973

В отделе физиологии и биохимии гетеротрофных микроорганизмов ИН?іШ АН СССР совместно с Краснодарским биохимическим комбинатом разработан регламент получения препаратов липидов с использованием культуры - продуцента -каротина. >’

Были исследованы некоторые вопросы влияния условий культивиро­вания на липогенез у trispora. (Бехтерева, 1973)» Однако, син тез функционально активных полярных липидов изучен недостаточно. Практически нет данных о зависимости процессов липогенеза у tri Sportt от снабжения клеток гриба фосфатами и взаимосвязи синтеза липидов с другими метаболическими процессами и ультраструктурними особенностями клеток гриба. Изучение этих вопросов и являлось ос­новной задачей экспериментальной работы.

Раздел I, Липогенез у E>t.tri$poro. в связи с морфологическими и физиолого-биохимическими особенностями

развития культуры на средах с различным содержанием фосфатов

Глава I. Некоторые морфологические особенности btirisporo. связанные с содержанием фосфора в среде Вегетативное тело /3?. tris рога представлено несептированным

ценотическим мицелием, состоящим из разветвленных гиф, ведущих свое начало из споры. Известно, что начальные ростки мицелия пи­таются за счет запасов, имеющихся в споре, а для дальнейшего раз­вития требуется питание извне (Черепанова,1981).

При наблюдении морфологической картины начальных этапов прорастания спор tri - spora на используемых нами синтетических средах было установлено, что прорастание спор начиналось в среднем через 4-6 часов после внесения споровой суспензии. При этом интенсивность процесса за- висила от содержания фосфатов в среде. На синтетической среде с исходной концентрацией фосфатов 0,05%, наблюдалось активное прорас тание спор гриба: через 4 часа инкубации в поле зрения были видны разбухшие споры с гетерогенным содержимым с одной или двумя росто­выми трубочками, которые иногда достигали значительной длины (45-75 мкм и более) (рис.1а). На среде с исходной концентрацией фосфатов 0,5%, можно было встретить споры, содержащие не только два, но и три проростка (рис.16). В то же время, совершенно иная картина наблюдалась на среде с дефицитом фосфора (исходная кон­центрация фосфатов около 0,005%) (рис.Ів). Во-первых, в отличие от двух отмеченных выше вариантов, в поле зрения в большом коли­честве встречались еще не проросшие спори, представленные как ак­тивированными, разбухшими: так и неактивными формами. Кроме того, нам не удалось на ранних этапах прорастания (4-6 часов) выявить в "-"Р варианте споры с 2 или 3 проростками.

Рис. Іа Характер прорастания спор /Зі?, trisporct на среде с исходной концентрацией фосфатов 0,05%

(фазовый контраст, увеличение 2000)

Рис.Іб Прорастание спор BE.tr ispora на среде с исходной концентрацией фосфатов 0,5% (фазовый контраст, увеличение 2000)

Рис.Ів Споры BLtrisрогц через б часов инкубации в среде

с дефицитом фосфатов (фазовый контраст,увеличение 2000)

Таким образом, выявлено, что состав питательной среды, в част­ности, фосфаты оказывают влияние на скорость и характер формирова­ния проростков спор Bf.

trispora.

Концентрация фосфора в среде влияет и на дальнейшее развитие мицелия trispora. Было проведено сравнительное морфологичес­кое наблюдение за процессом развития мицелия гриба на синтетичес­кой среде Н22 при достатке ("+"Р вариант) и дефиците ("-”Р вариант) фосфора в среде. Через 48 часов культивирования гриба мицелий обо­их вариантов представлен тонкими гифами, однако отростки гиф были более короткими в ”-"Р варианте опыта (рис.2а,б). Очевидно, дефи­цит фосфора в среде препятствовал их активному росту. В дальнейшем, (96-часовой мицелий), морфология культуры в "-"Р варианте практи­чески не менялась, в то время как в "+"Р варианте встречались клет­ки с многочисленными вздутиями, предшествующими, вероятно, образо­ванию органов спороношения (рис.За). В мицелии же ”-”Р варианта лишь через 144 часа развития появлялись немногочисленные вздутия клеток, тогда как на гифах гриба, развивающегося в условиях достат­ка фосфора в среде, в это время наблюдали уже крупные спорангии (рис.36).

Электронно-микроскопические исследования позволили выявить тонкие цитологические особенности мицелия В£. trispora связанные с содержанием фосфатов в среде.

При анализе мицелия, выращенного на среде с исходной концент­рацией фосфатов 0,05?б отмечено,что в молодой (41 час) культуре гриба преобладали активно метаболизирующие клетки с гомогенной ци­топлазмой и ярко выраженными митохондриями (рис.4а). Мембранный аппарат, представленный эндоплазматически),і ретикулумом, выглядел типично для мембран, имеющих в качестве липидного компонента фос­фолипиды (темные электронно-плотные тяжи) (рис.46). Однако, в ряде клеток встречались и модифицированные мембранные образования,

РиСц2а Мицелий bP.trispora. через 48 часов культивирования на среде с достатком фосфатов Зфазовый контраст, увелич.500)

ftР.

trisporo. через 48 чаеов культивирования на среде с дефицитом фосфатов (фазовый контраст, увелич. 500)

Рис.За Мицелий Bf. trispora на среде с достатком

У6 часов культивирования овый контраст, увелип. 500)

Ffrc.o6 Мицелий bt. trispora через 144 часа культивирования на среде с достатком фосфатов (фазовый контраст, увелич. 500).

Рис.4а (увеличение 8000) М - митохондрии

Рис.46 (увеличение 20 ООО) ЭПР - эндоплазматический

ретикулум

Электронные микрофотографии клеток trispora. (41-часо­вой мицелий; среда с исходной концентрацией фосфатов 0,05%).

которые структурно были представлены фрагментами различной степе­ни изогнутости и отличались по электронной плотности от мембран насыщенных фосфолипидами (рис.5). Количество модифицированных мембранных структур возрастало в процессе дальнейшего культивирова­ния гриба.

При дефиците фосфатов в среде явление модификации мембран эндоплазматического ретикулума было выражено особенно резко: в этом случае в большинстве препаратов наблюдалось практически пол­ное перероадение мембранного аппарата (рис.6). Обнаруженное явле­ние указывает на возможную модификацию липидного компонента мемб­ран, что и было подтверждено биохимическими исследованиями , опи­санными ниже.

Кроме отмеченных цитологических особенностей, была выявлена динамичность клеточной стенки triipora связанная как с фаза­ми развития гриба, так и с концентрацией фосфатов в среде. Так, в процессе развития гриба на среде с 0,05% фосфатов, толщина кле­точных стенок, как правило, многослойных (рис.7) , составляла через 41 час культивирования 500-1650 нм, через 65 часов - 370- -630 нм, а через ИЗ часов - 530-2000 нм. Уменьшение толщины кле­точной стенки через 65 часов культивирования гриба, сопровождалось снижением ее слоистости и изменениями волокнистости.

Наряду с мно­гослойными клеточными стенками, в этом варианте опыта наблюдали клетки и с более гомогенной организацией клеточной стенки.

При дефиците фосфатов в среде были отмечены некоторые особен­ности в строении клеточной стенки triSpOrQ. Через 41 час культивирования гриба толщина клеточных стенок составляла 300- -1000 нм, при этом, слоистость была менее выражена по сравнению с клеточными стенками предыдущего варианта, а также отмечена иная укладка фибрилл хитинового остова (рис.8а). Через последующие 24 часа роста гриба (65-часовой мицелий), клеточная стенка удваива-

- 73

Рис. 5

Модифицированные мембранные образования (ММ0),выяв ленные в клетках ЬСЛгЛрога. (увеличение 20 ООО)

Рис.6 Перерождение мембранного аппарата (эндоплаэматическо' го ретикулума) в клетках trispora при дефиците фосфатов кВ среде

Рис«7 Клеточная стенка (КС) ВЄ. /rispor^ при развитии

гриба на среде с исходной концентрацией фосфатов 0,05% (41-часовой мицелий). Увеличение 20 ООО.

ft

<< | >>
Источник: ГОНЧАРОВА Ольга Владимировна. ЛИПОГЕНЕЗ У ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ МИЦЕЛИАЛЬНЫХ ГРИБОВ В СВЯЗИ С ОСОБЕННОСТЯМИ ИХ РАЗБИТИЯ НА СРЕДАХ С РАЗЛИЧНЫМ СОДЕРЖАНИЕМ ФОСФАТОВ. Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук. Москва - 1985 г.. 1985

Скачать оригинал источника

Еще по теме 2. Результаты исследования и их обсуждение:

  1. Глава 7. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ
  2. 8.4. Регулирование системы с целью реализации управленческих, решений (IV технологофункциональная , фаза процесса управления)
  3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
  4. Глава 7 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
  5. РАЗДЕЛ 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
  6. 2. Результаты исследования и их обсуждение
  7. ГЛАВА 5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ И ЗАКЛЮЧЕНИЕ
  8. Обсуждение результатов проведённых исследований у больных поясничным остеохондрозом в стадии обострения до лечения
  9. ГЛАВА 6. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ЗАКЛЮЧЕНИЕ
  10. ГЛАВА 4 ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ ДАННЫХ
  11. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
  12. ГЛАВА 3. Результаты исследования
  13. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ
  14. Глава 6. ПАТОГЕНЕТИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ ПРИМЕНЕНИЯ ДИСУЛЬФИДОВ ГЛУТАТИОНА В ПРОФИЛАКТИКЕ И ТЕРАПИИ ХИМИОЛУЧЕВЫХ ОРАЛЬНЫХ МУКОЗИТОВ (обсуждение полученных результатов)
  15. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ СОБСТВЕННОГО ИССЛЕДОВАНИЯ
  16. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
  17. ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
- Акушерство и гинекология - Анатомия - Андрология - Биология - Болезни уха, горла и носа - Валеология - Ветеринария - Внутренние болезни - Военно-полевая медицина - Восстановительная медицина - Гастроэнтерология и гепатология - Гематология - Геронтология, гериатрия - Гигиена и санэпидконтроль - Дерматология - Диетология - Здравоохранение - Иммунология и аллергология - Интенсивная терапия, анестезиология и реанимация - Инфекционные заболевания - Информационные технологии в медицине - История медицины - Кардиология - Клинические методы диагностики - Кожные и венерические болезни - Комплементарная медицина - Лучевая диагностика, лучевая терапия - Маммология - Медицина катастроф - Медицинская паразитология - Медицинская этика - Медицинские приборы - Медицинское право - Наследственные болезни - Неврология и нейрохирургия - Нефрология - Онкология - Организация системы здравоохранения - Оториноларингология - Офтальмология - Патофизиология - Педиатрия - Приборы медицинского назначения - Психиатрия - Психология - Пульмонология - Стоматология - Судебная медицина - Токсикология - Травматология - Фармакология и фармацевтика - Физиология - Фтизиатрия - Хирургия - Эмбриология и гистология - Эпидемиология -