Экспериментальная часть диссертационного исследования

Исследование проведено на 47 крысах - самках Вистар с массой тела

200-270 г, полученных из питомника "Рапполово" РАМН. Животные содержались в стандартных условиях вивария, получали полнорационный брикетированный комбикорм (рецепт ПК-120) производства компании "Лабораторкорм" (Москва), и водопроводную питьевую воду без ограничений.

Перфузии проводили в операционной вивария на базе ФГБУ "НИИ онкологии им. Н.Н. Петрова" Минздрава России, г. Санкт-Петербург. Экспериментальная установка для внутрибрюшинной

химиогипертермической перфузии собрана из оборудования производства центрального научно-исследовательского и опытно-конструкторского института робототехники и технической кибернетики (Россия) и состоит из мехатронного перфузионного роликового насоса "Марс", бани термостатирующей прецизионной LOIP LB-200 [6].

В установке для проведения ВХГП с минимальным экстракорпоральным контуром использовался лабораторный перистальтический насос Peripump и лазерный излучатель АСТ 01 с целью создания гипертермии в брюшной полости. Также были использованы грелка (Microlife FH 80, размер 30,5x34,5 см, Германия), цифровые термометры CheckTemp (Hanna, Германия), катетеры (КД Медикал ГмбХ Хоспитал Продактс Германия), рассасывающийся шовный материал (Safil 3/0 B/Braun, Германия), нерассасывающийся шовный материал (Ethibond Excel 2.0, Johnson & Johnson, Ethicon, США).

Использованы лекарственные препараты: цисплатин (Фармахеми Б.В., Нидерланды) в виде раствора для инъекций (0,5 мг/мл), кетопрофен (Фламакс, ЗАО "ФармФирма "Сотекс", Россия), тиопентал натрия (ОАО "Акционерное Курганское общество медицинских препаратов и изделий "Синтез", Россия), цефтриаксон (Медокеми Лтд.

Была создана и отработана техника проведения химиогипертермических перфузий брюшной полости с применением минимального экстракорпорального контура. Длительность химиоперфузии, дозы препаратов для наркоза и обезболивания были отработаны в предыдущих исследованиях [6]. Аппаратное и медикаментозное обеспечение данных способов проведения внутрибрюшинной химиогипертермической перфузии показаны ниже (Табл. 10).

Таблица 10

Техническое и медикаментозное обеспечение эксперимента

При проведении эксперимента штамм опухоли яичника постоянно перевивали внутрибрюшинно нескольким крысам. Всего для поддержания штамма были использованы 38 экспериментальных лабораторных животных.

От одной крысы на 5-7-й день после перевивки ОЯ брали асцит, разбавляли его стерильным физиологическим раствором и затем вводили

п

внутрибрюшинно точное количество опухолевых клеток (1x10 ) крысам экспериментальных групп. Подсчет клеток производили в камере Горяева. Для формирования экспериментальных групп ОЯ перевивалась 47 крысам.

В зависимости от способа проведения ВХГП крысы были разделены на следующие группы: I группа - контроль, закрытая ВХГП с цисплатином (20 мг/кг массы тела) по ранее отработанной методике (n = 17); II группа - открытая ВХГП с цисплатином (20 мг/кг массы тела) по ранее отработанной методике (n = 15); III группа - закрытая ВХГП с цисплатином (20 мг/кг массы тела) на основе минимального экстракорпорального контура с применением лазерного излучателя АСТ 01 (n = 15) (Табл. 11).

Распределение лабораторных животных по группам

Таблица 11

День перевивки был принят за нулевой. Противоопухолевые эффекты проводимого лечения оценивались по МПЖ. Также в послеоперационном периоде проводился контроль за восстановлением массы тела лабораторных животных во всех экспериментальных группах.

Результаты эксперимента подвергали статистической обработке на персональном компьютере с помощью программ Excel, GraphPad Prism 6, SPSS Statistics 17.0. Статистический анализ показателей выживаемости проводили с использованием критерия Лиллиефорса, показателей МПЖ в группах - с помощью непараметрического критерия U (Манна-Уитни), кривых выживаемости - по тесту Мантела-Кокса (Log-rank test). Различия считали статистически значимыми при p