3.1. Критерии диагностики.

По мнениюмногихавторов в настоящее время, для установления этиологии инфекционного заболевания, предпочтение отдается молекулярно­биологическим и иммуноферментным методам анализа.

Внашей работе в критерии диагностики были включены результаты НРИФ, позволяющие выявить антигены полной сборки вируса в лимфоцитах, что имеет большое значение в диагностике стадий персистирующей герпетической инфекции, а также, ее реактивации, когда у большинства пациентов АТ класса Ig M отсутствуют, а АТ класса Ig G многократно возрастают.[30].

Выявление антигенов ГВ в клетках крови проводили непрямой реакцией иммунофлюоресценции (НРИФ) с помощью разработаных экспериментальных тест-систем для определения антигенов ВПГ I, II, ЭБВ, ЦМВ, ВПГ-6, используя высокотитражную сыворотку, в лаборатории эпидемиологии оппортунистических инфекций. Иммунофлюоресцентный метод основан на обнаружении светящихся комплексов антигена возбудителя (липополисахарида или основного белка наружной мембраны) со специфическими антителами с использованием люминисцентного микроскопа. При люминисцентной микроскопии вирусы герпесов имеют специфическое, интенсивное изумрудно-зеленое свечение. Антиген вируса может быть обнаружен не только в ядре, но также и в цитоплазме неизменененных клеток.[29].

Наличие свечения антигена в ядре и в цитоплазме клеток свидетельствовало о законченной репликации вируса, т. е об активном инфекционном процессе. Мы считали положительными результаты внутриклеточной флюоресценции при наличии не менее трех светящихся антигенсодержащих клеток в поле зрения.

Диагностически значимым образцом считается наличие более 3 светящихся клеток в лунке как при постановке НРИФ(рис. 2,3,4)

Рисунок 2. Лейкоциты, пораженные ЦМВ

Рисунок 3. Лейкоциты, пораженные ВЭБ

Рисунок 4. Лейкоциты, пораженныеВГЧ 6 типа.