4. ХРОНОБИОЛОГИЧЕСКИЙ ФАКТОР ПРИ ОЦЕНКЕ ТОКСИЧНОСТИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ
Токсичность лекарственных веществ зависит от многих факторов, одним из которых является функциональное состояние организма и его отдельных органов и систем.
Функциональное состояние организма, а, следовательно, его реактивность изменяются во времени, т.к.
пространственно-временная организация живой материи обуславливает периодичность колебания интенсивности процессов, происходящих в организме. Биоритмические количественные и связанные с ними качественные изменения можно наблюдать на всех уровнях: молекулярном, субклеточном, клеточном, органном и системном с помощью различных методов. Различают высокочастотные ритмы с продолжительностью периода менее 0,5 ч, среднечастотные, включающие ультрадианные, с продолжительностью периода 0,5-20 ч, циркадианные или циркадные (околосуточные) с периодом 24-48 ч, низкочастотные - циркасептадные (7±3 сут), циркади- гептанные (30±7 сут) и циркааннюальные (1 год±2 мес) [219].Биоритмы разных уровней целостного организма не синхронны, имеют сложную структуру и служат предметом специальных исследований с применением математических методов, поскольку изменения одного и того же показателя обычно включают разночастотные ритмы. Координация биоритмических изменений и иерархия хронологических связей в целостном организме осуществляются благодаря взаимодействию эндокринной и центральной нервной систем с исполнительными органами. Это обеспечивает активацию и восстановление функций организма, сохранение гомеостаза и возможность адаптации к изменяющимся условиям существования [12, 244].
Изучение хроноструктуры живых систем составляет предмет хронобиологии - науки о временных характеристиках биологических процессов, задачей которой является изучение биоритмических изменений, происходящих на всех уровнях организма в норме и патологии, выяснение условий, влияющих на их структуру, и исследование реакции организма в зависимости от временного фактора [116, 134].
Данные по изучению биоритмичности процессов, происходящих на различных уровнях организма, изложены в отечественных и зарубежных обзорах [59, 72, 196]. Показана периодичность изменений проницаемости клеточных мембран, внутриклеточного перераспределения ферментов и колебаний ферментативной активности, циркадная динамика популяции нейроци- тов разных отделов нервной системы, суточные и сезонные изменения митозов в клетках разных тканей, сезонные колебания активности стромальных клеток, предшественников костного мозга, и периодич-ность изменений миелограммы [93, 115, 152, 191].
В настоящее время большое внимание уделяется изучению био- ритмической деятельности эндокринной системы [79,170]. Актуальна корреляция сезонных изменений в половом поведении животных с сезонными колебаниями секреции тестостерона и эстрадиола [38, 169]. Взаимоотношению суточных биоритмов иммунной и эндокринной систем придается очень большое значение [91,92]. Биологическим ритмам подвержена секреция альдостерони, АКТГ, глюкокортикоидов [128,166], свертывающей системы крови, пищеварительной и других систем организма [2, 161]. Следует отметить, что хронобиологический подход к изучению физиологических процессов предвосхитил еще И.П.Павлов, всегда учитывавший в своих исследованиях значение временного фактора. Возможность биоритмических, в первую очередь циркадных и сезонных изменений необходимо учитывать на всех этапах доклинических токсикологических исследований.
Значение биоритмов применительно к токсикологическим исследованиям может быть рассмотрено в нескольких аспектах:
1. Необходимость учета периодических изменений (в первую очередь суточных и сезонных) физиологических, морфологических, биохимических, гематологических и других показателей гомеостаза животных, используемых при токсикологической характеристике лекарственных средств.
2. Исследование изменений структуры биоритмов в качестве одного из показателей токсического действия лекарственных препаратов.
3. Изучение влияния хронологического фактора на чувствительность организма к лекарственному препарату.
4. Разработка оптимальной схемы применения лекарственного препарата на основе экспериментального изучения суточных и сезонных показателей его токсичности [25].
Наши многолетние наблюдения подтверждают данные литературы [7, 14] о сезонных колебаниях некоторых биохимических показателей сыворотки крови (табл. 29).
Таблица 29 - Активность некоторых ферментов в сыворотке крови крыс в разные сезоны
Фермент | Количество ЖИВОТНЫХ | Время года | ||
Зима | Весна | Лето | ||
АЛТ, ед/л | 100 | 27,0+2,4 (24,6+29,4) | 4,5±2,12 (22,3+26,6) | 22,6±2,8 19,8+25,4) |
50 | 31,9 (18,8+44,9) | 23,7 (64,6+77,1) | 46,4 (39,1+53,6) | |
ACT, ед/л | 100 | 70,8±4,5 (66,3+75,3) | 63,4±4,88 (58,5+68,2) | 63,4±5,46 (57,9+68,8) |
50 | 81,2 (68,1+94,2) | 64,6 (54,5+74,5) | 87,7 (78,3+97,1) | |
Щелочная | 100 | 17,9±0,8 | 21,7±1,03 | 21,7±1,43 |
фосфатаза, | (17,1+18,7) | (20,67+22,73) | (20,27+23,13) | |
ед/л | 50 | 22±1,1 | 29+1,1 | 35±0,9 |
Сезонным биоритмам подвержено содержание ферментных элементов крови, а также количество гемоглобина у белых крыс (табл.
30).Таблица 30 - Показатели периферической крови у крыс в разное время года
Фермент | Количество ЖИВОТНЫХ | Время года | |||
Весна | Лето | Осень | Зима | ||
Эритроциты, | 50 | 17,94±О,17 | 7,010,1 | 8,12+0,11 | 8,7310,13 |
млн/мкл | 100 | 4,9±0,2 | 5,110,4 | 5,110,2 | 4,910,2 |
Гемоглобин, г% | 50 100 | 12,5410,56 16,1±0,4 | 12,110,1 15,710,8 | 11,2± 0,15 16,0+0,4 | 10,8+0,13 15,410,6 |
Лейкоциты, | 50 | 12,0610,33 | 11,010,5 | 14,4+0,77 | 14,910,7 |
тыс/мкл | 100 | 13,812,2 | 12,3+1,6 | 13,2+1,1 | 11,610,5 |
Тромбоциты, | 50 | 675144 | 522+33 | 925+27 | 865125 |
тыс/мкл | 100 | 824,1136 | 797153,1 | 825145,4 | 823+35,1 |
Аналогичные изменения в показателях крови мы наблюдали у здоровых кроликов и морских свинок.
Сезонным ритмам подвержена двигательная активность здоровых крыс.
Так, при измерении двигательной активности у белых крыс в одно и то же время суток было установлено, что осенью горизонтальная активность и пройденное расстояние у самцов больше, чем весной.
У самок весной была повышена горизонтальная и вертикальная активность, и в среднем они пробегали большее расстояние, чем самцы, за одно и то же время (табл. 31).
Таблица 31 - Двигательная активность белых крыс в разное время года
Пол | Сезон | Горизон тальная двигательная активность | (1 | Пройденное расстояние (в см) | п | Вертикальная двигательная активность | п |
Самцы | Весна | 1419 (1278+1560) | 18 | 572 (431+713) | 18 | 75 (53+97) | 17 |
Самцы | Осень | 2539 (1976+3102) | 19 | 1520 (1010+20) | 19 | 98 (66+130) | 18 |
Самки | Весна | 3316 (2827+3805) | И | 1760 (1338+2182) | 11 | 215 (157++273) | 11 |
Существенное различие в некоторых показателях состояния гомеостаза интактных животных в разное время года необходимо учитывать при проведении токсикологических исследований, особенно хронической токсичности, когда введение лекарственных средств может продолжаться не один сезон. При описании эксперимента и его результатов следует обязательно указывать дату его начала и окончания. Сезонным циклам подвержена чувствительность животных к некоторым лекарственным средствам.
Например, при исследовании у мышей тератогенного действия кортизола было показано, что нарушение развития небных костей у новорожденных наблюдается значительно чаще, если препарат вводили беременной самке в зимние месяцы.
Летом кортизол крайне редко вызывает аномалии развития. Сезонный характер имеет гепатотоксичность тетрациклина, билигноста и других лекарственных препаратов [72].Биоритмы организма имеют видовые, половые и возрастные отличия, и хотя они генетически детерминированы, различные факторы могут оказать влияние на их структуру в отдельных органах, системах и организме в целом.
Так, биоритмические изменения некоторых показателей, например концентрации кальция, холестерина, связаны с геофизическими факторами [85, 93]. Изменения солнечной активности и геомагнитного поля
Земли оказывают влияние на автоколебания активности ряда ферментов микроорганизмов [126]. Получены данные о влиянии светового режима на биоритмы. Установлено, что периодичность колебаний биохимических показателей крови, ректальной температуры, двигательной активности и др. зависит от изменений фоторежима [19, 23, 24, 135, 222]. Опыты на крысах показали, что структура биоритмов изменяется при голодании [42], под влиянием стресса [231], при воздействии радиации [117], у животных с удаленными надпочечниками [88] и эпифизом [11].
Таким образом, многие факторы оказывают воздействие на биоритмы организма, но и сами биоритмы могут обеспечивать ту или иную чувствительность организма к различным ксенобиотикам, в т.ч. и к лекарственным средствам. Наиболее значимыми для лекарственной токсикологии являются суточные или циркадные ритмы. Адсен с соавт. еще в 1931 г. в опытах на мышах показали, что судорожная активность инсулина в вечерние часы значительно ниже, чем в дневные. Например, для того, чтобы процент животных, отвечающих судорогами на введение инсулина, был одинаков, вечером доза препарата должна быть в 2 раза выше, чем в полдень [177]. В опытах на грызунах наличие циркадных ритмов токсичности было найдено также и для других препаратов, вызывающих судороги.
Carlson et al. установили, что введение одной и той же дозы никета- мида (кордиамина) мышам в 2 ч ночи вызывает гибель 67% животных, в то время как при введении препарата в 14 ч летальность вдвое ниже. Авторы отмечают, что в течение суток изменяется не только токсичность лекарств, но и их эффективность, причем ритмы этих изменений не синхронны и максимумы чувствительности животных в отношении разных показателей действия одного и того же препарата могут значительно различаться во времени [186].
Значительное внимание исследователей привлекли биоритмические изменения чувствительности к различным психотропным (стимулирующим и успокаивающим) средствам [239, 242].
Зависимость токсичности от времени введения отмечена для ряда нестероидных противовоспалительных препаратов (НПВГТ), в т.ч. для производных салициловой кислоты, ацетилсалициловой кислоты, ибупрофена (бруфена), ортофена (диклофенак натрия, вольтарен). Наши исследования подтвердили, что при введении НПВП в утренние часы ульцерогенный эффект у крыс значительно выше, чем при введении их в вечернее время [56].
Суточные колебания не только в отношении общетоксического, но и специфического действия противоопухолевых препаратов показаны на примере цисплатина и циклофосфамида [182, 268].
В наших исследованиях также было показано, что противоопухолевый препарат спиробромин более токсичен при введении мышам и крысам в 10-12 ч (в сравнении с 18-20 ч). В группах животных, получавших спиробромин в утренние часы, погибло 60% животных, а в группах, получавших его в вечернее время, только 23%. Показатели нарастания массы тела животных и продолжительности их жизни также подтверждали меньшую токсичность спиробромина при введении вечером [102].
Еще в 1969 г. появилось сообщение, что терапевтическая эффективность и токсичность противоопухолевых препаратов из группы антиметаболитов (5-фторурацил, цитозинарабинозид) зависят от времени их введения. Авторы обратили внимание на то, что схема применения препаратов должна быть согласована с ритмами митоза клеток. Романовым Ю.А. с соавт. было установлено, что для возникновения суточного ритма размножения клеток в асцитной опухоли Эрлиха и эпителии пищевода мышей необходимо совпадение во времени расположения в течение суток активных фаз, биоритмов чувствительности клеток к действию кейлонов из этих тканей, обратимо ингибирующих пролиферацию, и продукции кейлонов этими тканями. Таким образом, опухолевые клетки наиболее чувствительны к цитостатику в определенные часы. Время наибольшей чувствительности к цитостатикам опухолевых клеток и должно быть использовано для введения препаратов этой фармакологической группы [137].
Проблемы хронобиологии подробно изложены в обзоре Бланк М.А. и соавт. [31]. Большое значение в биоритмологии уделяется эндокринной системе. Биологические ритмы деятельности гипоталамо- гипофизарно-надпочечниковой системы у животных и человека в норме и патологии подробно рассмотрены в работах Романова Ю.А. и соавт. [93, 133]. Хорошо изученной является проблема чувствительности надпочечных желез к экзогенному введению кортикостероидных гормонов в разное время суток в качестве лекарственных средств. В 1956 г. появилось сообщение о том, что подавление функции надпочечников минимально при назначении кортикостероидных гормонов 1 раз в день между 8 и 10 ч утра [261]. Эти наблюдения неоднократно подтверждались в последующих исследованиях. Было установлено, что дексаметазона в дозе 0,5 мг при приеме в 8 ч утра уменьшает количество кортикостероидов, секретируемых в течение суток, с 19,2 до 7,2 мг, а после приема препарата в 24 ч этот показатель уменьшается до 1,9 мг. Экскреция 17-оксикортикостероидов снижается в большей степени при назначении дневной дозы кортикостероидных гормонов в несколько приемов, чем при однократном приеме в 8 ч утра. У больных с кожными заболеваниями однократный прием триамцинолона в 8 ч утра был более эффективен и вызывал меньше побочных эффектов, чем прием препарата несколько раз в сутки в той же суточной дозе [176]. Этот факт имеет очень большое значение, поскольку позволяет получить терапевтический эффект при использовании меньшей дозы триамцинолона, а значит уменьшить возможность его токсического действия.
В экспериментах на животных также получены данные, подтверждающие зависимость развития побочных эффектов при применении кортикостероидов в разное время суток. На инбредных мышах было показано, что введение метилпреднизолона в 16 ч вызывает минимальную потерю массы тела и более слабый тимолитический эффект, чем при введении препарата между 4 и 8 ч утра [273].
Временная зависимость действия гормонов проявляется не только в условиях целостного организма, но и в опытах in vitro. По имеющимся наблюдениям, реакция изолированного надпочечника мышей на АКТГ зависит от времени извлечения железы и наиболее выражена в том случае, когда операция производилась в период минимальной концентрации кортикостерона в крови животного [281].
Таким образом, имеющиеся многочисленные данные свидетельствуют о том, что функциональное состояние надпочечных желез, которое подчиняется биологическим ритмам, имеет большое значение для их чувствительности к ксенобиотикам, в т.ч. и к лекарственным препаратам. Это особенно важно для лекарственных препаратов, органом- мишенью которых являются надпочечники.
Ertel R. et al. [197] показали, что активность и токсичность ингибитора кортикостероидных гормонов метопирона зависит от времени его применения. При введении животным, ведущим ночной образ жизни, в вечерние часы препарат был менее токсичен. Аналогичные результаты были получены нами при изучении токсичности диоксидина (1,4-ди-Т4- окси-2,3-диоксиметилхиноксалина), применяющегося в медицинской практике в качестве антибактериального средства и в высоких дозах ингибирующего биосинтез кортикостероидных гормонов в коре надпочечных желез [50].
Опыты проводили в феврале-марте на половозрелых крысах-самцах. Диоксидин вводили через зонд в желудок в виде 3% водного раствора, который готовили ex tempore. Препарат применяли в дозе 500 мг/кг в течение 2 дней или 250 мг/кг в течение 5 дней. Повторное применение диоксидина в указанных дозах, по данным наших предыдущих исследований, вызывает необратимые патологические изменения в надпочечниках и гибель животных. Каждую дозу препарата изучали на 2 группах животных. Крысам 1-й группы диоксидин вводили в 12 ч, крысам 2-й
группы - в 20 ч, т.е в часы минимальной и максимальной концентрации кортикостероидов в крови [174].
Полученные результаты показали, что у крыс, получавших диоксидин в 20 ч, его токсическое действие было значительно слабее, чем при введении той же дозы препарата животным в 12 ч (табл. 32).
Таблица 32 - Выживаемость крыс, получавших диоксидин в дозе 500 мг/кг в течение 2 дней внутрь в разное время суток (длительность наблюдения 30 дней)
Группа | Время введения препарата, ч | Число выживших крыс | % выживших животных в группе | Средняя продолжительность жизни, сут |
1-я (п=24) | 12 | 6 | 25 | 15,9+1,3 |
2-я (п=28) | 20 | 15 | 51 | 22,3+1,2 |
Контроль (и = 20) | - | 20 | 100 | 30,0 |
Динамика массы тела экспериментальных животных также определялась временем суток введения диоксидина. Так, в течение 7 дней от начала введения диоксидина у животных, получавших препарат в 12 ч, масса тела уменьшилась на 8,68%, в то время как у крыс, которым диоксидин вводили в 20 ч, масса тела возросла на 12,3%.
У крыс, получавших диоксидин в утренние часы, отмечено в плазме крови повышение активности щелочной фосфатазы и аланинами- нотрансферазы, что не наблюдалось у животных, получавших препарат вечером.
Масса надпочечных желез, а также морфофункциональные изменения, а именно деструкция пучковой зоны коры, кровоизлияния в ее внутренние слои и степень сдавливания сетчатой зоны, были одинаковыми у животных, получавших диоксидин в разное время суток.
Таким образом, степень патологических изменений в надпочечниках не зависит от времени суток введения диоксидина, тогда как явления, связанные с нарушением биосинтеза кортикостероидных гормонов в коре надпочечников, выражены в меньшей степени у животных, получавших препарат в вечерние часы.
Следует иметь в виду нежелательное действие гормонов при экзогенном поступлении в виде лекарственных средств на органы, в которых происходит их биосинтез.
Кроме отрицательного влияния кортикостероидных гормонов на кору надпочечных желез [3], нами было показано отрицательное воздействие гормона эпифиза мелатонина на сетчатку глаза кроликов и крыс при длительном введении в высоких дозах. Этот эффект зависел от времени суток введения мелатонина экспериментальным животным. Повреждающий эффект на сетчатку мелатонин оказывал при введении крысам в вечерние часы. Введение препарата в той же дозе в утреннее время не вызывало каких-либо отрицательных изменений в сетчатке у крыс. У кроликов же был обратный временной эффект. Нежелательное воздействие на сетчатку было отмечено при введении препарата в утренние часы. Такое различие влияния мелатонина на сетчатку глаз у кроликов и крыс, по-видимому, связано с разным суточным биоритмом секреции мелатонина в сетчатке у этих двух видов экспериментальных животных. Не только биоритмы функционального состояния органа- мишени могут влиять на токсичность лекарственного препарата, но и сам препарат может нарушать биоритм функции органа-мишени. Подобное нарушение следует рассматривать как предпатологию. Так, в наших экспериментах было показано влияние диоксидина на циркад- ность содержания аскорбиновой кислоты в надпочечниках у крыс. Ди- оксидин вызывает снижение аскорбиновой кислоты в надпочечниках крыс при любом способе введения, начиная с дозы 20 мг/кг, причем вначале циркадный ритм содержания аскорбиновой кислоты в надпочечниках еще сохранен. Затем этот низкий показатель не изменяется во времени, а в структуре органа отмечаются патологические явления. Таким образом, нарушение циркадного ритма содержания аскорбиновой кислоты в надпочечных железах под воздействием диоксидина совпадает с развитием необратимых процессов в ткани органа-мишени.
Модуляция биоритмов может происходить под действием на организм алкоголя [18]. Динамика суточной двигательной активности крыс изменяется под влиянием пропанолола и других [3- адреноблокаторов [10, 80], препаратов, блокирующих обратный захват моноаминов [258], под действием метамфетамина [235], изопротеренола [210]. Отмечено влияние вазопрессина на циркадианный ритм потребления пищи и воды, экскреции мочи и электролитов [150]. В опытах на мышах наблюдалась модуляция суточного ритма концентрации глюкокортикоидных гормонов под влиянием тимоптина [168]. Многие лекарственные препараты в определенных дозах и схемах применения могут нарушать биоритм функций того или иного органа, что приводит к десинхронозу, который можно рассматривать как предпатологию, которая способна перейти в патологию.
Таким образом, при доклинической токсикологической оценке лекарственных веществ следует иметь в виду возможность усиления или
ослабления действия исследуемого вещества в зависимости от времени его применения. Изменения разных показателей токсичности и терапевтической эффективности лекарственных препаратов несинхронны. Например, максимумы наркотического и токсического эффектов пенто- барбитала и галотана находятся в инверсных отношениях. Изменения токсичности нестероидных противовоспалительных препаратов не сопровождаются изменениями их терапевтического действия. Опыты на кроликах с лимфосаркомой Плисса показали, что эффективность метотрексата примерно в 3 раза выше в дневные часы, чем в ночное время, а токсичность препарата при этом не изменяется [83]. Отсутствие параллелизма между изменениями разных показателей действия одного и того же лекарственного средства может быть связано с тем, что они опосредованы разными механизмами.
Сопоставление изменений ритмов различных показателей, характеризующих действие исследуемого вещества, в случае их синхронности позволяет высказать предположение об идентичности обеспечивающих их механизмов, и наоборот, несовпадение ритмов свидетельствует о различии в механизмах, ответственных за их периодичность. Различия в хроноструктуре действия параллельно исследуемых веществ, вызывающих внешне одинаковые эффекты, также могут указывать на различия в механизмах их действия.
Изучение процессов, обеспечивающих периодичность изменений токсичности и активности лекарственных средств, указывает, что они состоят из многих звеньев. В ряде случаев при этом следует учитывать биоритмические изменения метаболизма и фармакокинетики, которые, однако, не исчерпывают всего спектра ритмических изменений действия лекарственных препаратов [184,260, 276]. На примере гексобарби- тала и некоторых других наркотических веществ показано, что, хотя ритм изменений их наркотического действия обусловлен ритмом метаболизма и фармакокинетики, суточные изменения токсичности имеют другой период и связаны с другими факторами, в т.ч. с циркадными ритмами чувствительности отдельных структур мозга. Ритмические изменения действия средств, влияющих на ЦНС, связаны с суточными и сезонными изменениями чувствительности моноаминергических рецепторов [207]. Фиксирование времени проведения исследования позволяет с большей точностью оценить идентичность в действии различных образцов одного и того же препарата.
Экспериментальное изучение токсичности лекарственных средств проводят главным образом на здоровых животных. Заболевание, для лечения которого будет назначаться препарат, может вызывать нарушение биоритма определенных систем. Например, инфекционный процесс практически никогда не протекает изолированно, в него вовлекаются различные органы и системы, функциональное состояние которых подвержено биологическим ритмам. Так, септический процесс протекает в условиях, когда утрачены или снижены функции целого ряда органов: почек, печени, надпочечников, центральной нервной системы [236]. Особую роль при развитии инфекции играют надпочечные железы. Хорошо известно развитие острой надпочечниковой недостаточности при менингококковой менингококцемии (синдром Уотерхаузена- Фридериксона), стафилококковой и стрептококковой инфекции, пневмонии [9]. Поражение надпочечников наблюдается при ряде кишечных инфекций бактериальной этиологии, в т.ч. при пищевых токсикоинфек- циях, сальмонеллезе, дизентерии, причем в первые часы развития инфекции наблюдается повышение функции коры надпочечных желез, которое затем сменяется их угнетением. Чем тяжелее интоксикация, тем более выражен гипокортицизм [17]. С другой стороны, недостаток кортикостероидных гормонов в крови, наблюдающийся при гипокортициз- ме, усиливает интоксикацию, в связи с чем в клинике для снятия интоксикации применяют кортикостероидные гормоны. Все это свидетельствует об огромной роли кортикостероидных гормонов в тяжести течения инфекционного процесса. Учитывая, что секреция кортикостероидов у человека и животных подвержена суточному биологическому ритму, благодаря чему надпочечники находятся в состоянии покоя около 18 ч в сутки [174], время инфицирования организма в разное время суток может иметь определенное значение для развития инфекционного процесса.
В своих исследованиях мы показали, что чувствительность животных к бактериям и вирусам зависит от времени суток их инфицирования. Изучение хроночувствительности мышей к бактериальной инфекции (S.typhi) проводили на самках и самцах двух возрастных групп: 1,5 мес и 6 мес. Мышей инфицировали в утреннее (10 ч) или вечернее (20 ч) время. Эти часы для инфицирования были выбраны в связи с тем, что у животных, ведущих ночной образ жизни, к которым относятся мыши, максимум секреции кортикостероидов, от потенции которых зависит устойчивость к инфекции [39], приходится на 20-22 ч, а минимум -на 10-12ч [189].
Проведенные исследования показали, что летальность в группе мышей, зараженных утром, составляет 40 и 60% в зависимости от величины заражающей дозы, а в группе животных, инфицированных вечером, она составляет 5 и 20% соответственно (табл. 33).
Таблица 33 - Летальность мышей, инфицированных утром или вечером (на 10-е сутки после инфицирования)
Величина заражающей дозы в млн. КОЕ | Погибло при заражении в группе, о/ /О | |
Утром | Вечером | |
0,5 | 0 | 0 |
0,75 | 40 | 5 |
1,0 | 60 | 20 |
2,5 | 100 | 100 |
5,0 | 100 | 100 |
Развитие инфекции у мышей, зараженных утром и вечером, протекает с различной скоростью. По показателю выживаемости у мышей, инфицированных в вечерние часы, течение инфекции более благоприятное, особенно в первые сутки после заражения (табл. 34).
Таблица 34 - Влияние суточных ритмов на течение брюшнотифозной инфекции у мышей
Время заражения | Выживаемость | |||||||
Через 24 ч | Через 27 ч | Через 72 ч | На 10-е сутки | |||||
Абс. | % | Абс. | % | Абс. | % | Абс. | % | |
10:00 | 26 | 44 | 11 | 18 | 2 | 3 | 0 | 0 |
20:00 | 49 | 81 | 44 | 73 | 38 | 63 | 3 | 5 |
Примечание. В каждой группе 50 животных.
Через 24 ч после инфицирования гибель животных в группе при заражении утром составляла 80%, в то время как при заражении в вечернее время - 40%. Через 72 ч, как правило, все животные погибали в группе с утренним инфицированием, а при вечернем заражении выживало 20-40% животных.
Возраст животных также имел существенное значения для их чувствительности к инфекции, как в утренние, так и в вечерние часы. На нашей модели была изучена пространственно-временная организация системы пролиферации и энергетического обмена в эпителии структурнофункциональной единицы тонкой кишки "крипта-ворсинка". Было показано, что изменения, происходящие при инфицировании животных в пространственно-временной организации пролиферативной системы
эпителия крипты, не представляют собой простое сложение изменений, развертывающихся при этом, а имеют собственные закономерности [136].
Хронозависимость была установлена и при заражении мышей вирусом гриппа. Выживаемость мышей была выше в группе, инфицированной в вечернее время.
Таким образом, хронобиологический фактор имеет большое значение при инфицировании экспериментальных животных и должен учитываться в исследовательской работе, особенно при изучении антимикробных препаратов [215, 217].
Еще по теме 4. ХРОНОБИОЛОГИЧЕСКИЙ ФАКТОР ПРИ ОЦЕНКЕ ТОКСИЧНОСТИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ:
- 1.9. Антиоксиданты как геропротекторы
- 4. ХРОНОБИОЛОГИЧЕСКИЙ ФАКТОР ПРИ ОЦЕНКЕ ТОКСИЧНОСТИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ
- ОГЛАВЛЕНИЕ