Лимфоциты

Лимфоциты образуются в эмбриональном периоде из лимфоидного ростка в костном мозге. Лимфоци-

Таблица 10.1.

Маркерные CD антигены, применяющиеся для идентификации типов лейкоцитов¹

¹ Обозначение лейкоцитарных антигенов (CD-duster designation — групповое обозначение) было рекомендовано ВОЗ для стандартизации этих антигенов.

² Для определения CD-анигенов используются моноклональные антитела с использованием методов проточной цитометрии и иммуногистохимии.

³ По мере накопления данных выясняется, что иногда наблюдается экспрессия многих антигенов клетками других линий, например, CD5 также определяется в некоторых подтипах В-клеток и при В-клеточнойлимфоцитарнойлейкемии.

ты можно классифицировать на основе места их развития: 1) Т-лимфоциты (тимус-зависимые) развиваются в тимусе и 2) В-лимфоциты, которые развиваются вне тимуса. В-лимфоциты развиваются у птиц в сумке Фабрициуса (bursa — сумка, отсюда термин «В-клетки»); функциональный эквиваленту человека — эмбриональная печень или костный мозг.

Неактивные малыелимфоциты — клетки приблизительно 8-10 мкм в диаметре, с малым объемом цитоплазмы и сферическим ядром, занимающим почти всю клетку. Ядро содержит конденсированный хроматин, который выглядит выражено базофильным лри обычной окраске препаратов. Bce неактивные популяции лимфоцитов сходны друг с другом морфологически и могутдифференцироваться только иммунологическими и иммуноморфологическими методами (табл. 10.1).

Т-лимфоциты (Г-клетки)

А. Распределение Т-клетокворганизме: Т-лимфоциты возникают в эмбриональном тимусе. B постэмбриональном периоде после созревания Т-лимфоциты расселяются в Т-зонах периферической лимфоидной ткани. Кэтим зонам относятся:

— паракортикальная зоналимфатическихузлов и пространство между лимфоидными фолликулами (70% лимфоцитов в лимфатических узлах — Т-лимфоциты);

— периартериальные зоны лимфоидных фолликулов в белой пульпе селезенки (40% селезе-. ночныхлимфоцитов — Т-клетки).

Т-лимфоциты непрерывно и активно циркулируют между периферической кровью и периферической лимфоидной тканью . От 80 до 90 процентов перифе- рическихлимфоцитов крови —Т-клетки.

Б. Трансформация Т-клеток: После стимуляции (активации) определенным антигеном, Т-лимфоциты преобразовываются в большие, активно делящиеся клетки, названные трансформированными Т-лимфоцитами, или Т-иммунобластами, из которых затем возникает исполнительное звено Т-клеток. Т-иммунобласты имеют размеры 15-20 мкм в диаметре, с большим объемом цитоплазмы и неправильным ядром со светлым хроматином и ядрышком; ядро располагается в центре клетки.

Этот процесс преобразования Т-клеток составляет стадию развития (усиления) иммунного ответа (рис. 10.1), в течение которой несколько Т-клеток, несущих рецепторы, которые распознают данный специфический антиген, формируют многочисленный клон Т-кле- ток исполнительного звена, активных против того же самого антигена, потому что они имеют соответствующий рецептор. Полный процесс активации Т-клетки начинается тогда, когда макрофаги перехватывают ан-

тиген и с помощью определенного механизма, который еще не достаточно изучен, «обрабатывают» антиген и повторно выводят его на поверхность клетки в соединении с МНС-молекулами перед взаимодействием с T- клеткой. Распознавание происходиттолькотогда, когда Т-клетка несет специфичный рецептор, способный распознавать комплекс «антиген — МНС-молекула».

В. Функцииэффекторных Т-клеток: эффекторные ,ie Т-клетки играют важную роль в трех функциях иммунной системы:

— клеточном иммунитете;

— регулировании активности В-клеток;

— гиперчувствительности замедленного (IV) типа.

І.Клеточныйиммунитет: включаетдваглавных ,ix аспекта:

— цитотоксичные клетки, несущие поверхностные антигены, вызывают прямое поражение клеток (цитотоксические или клетки-киллеры). Прямая цитотоксичность наблюдается при иммунологическом ответе на антигены на

Таблица 10.2.

Морфологические и функциональные характеристики лимфоидных клеток

¹ Хотя иммунобласты и лимфобласты морфологически различаются, некоторые авторы не делают различий между ними. Обе формы являются делящимися и имеюттипичное для таких клетокядро. Лимфобласты представляютсобой быстро делящиеся лимфоциты плода; название подчеркивает сходство этих клеток с клетками при остром лимфобластном лейкозе.

поверхности неопластических клеток, пересаженных тканей и инфицированных вирусом клеток. ЦитотоксическиеТ-клетки, возможно, вызываютлизис путем образования пор в цитоплазматических мембранах антигенположи- тельныхклеток.

— выработка лимфокинов; исполнительные T- клетки играют решающую роль в формировании иммунного ответа путем образования растворимых белков (лимфокинов), которые регулируют функции определенных клеток, например, макрофагов и других лимфоцитов (табл. 10.3).

2. Регулирование активности В-лимфоцитов: два важных подтипа Т-лимфоцитов принимают участие в регулировании функции В-лимфоцитов.

Хелперные Т-клетки (CD4 антиген-положитель- ные) помогают в активации и трансформации В-лим- фоцитов ивсинтезе иммуноглобулинов. Супрессорные T-клетки (CD8 антиген-положительные) ингибируют активацию В-клеток и регулируют синтез иммуноглобулинов. Хелперные и супрессорные Т-клетки также оказывают подобные регулирующие влияния и на клеточный иммунитет. Однако, подтип С04-положительных «хелперных» клеток может оказывать чисто супрессорное влияние, стимулируя С08-положительные супрессорные клетки. Нормальное отношение хелперныхТ- лимфоцитов к супрессорным Т-лимфоцитам (отношение CD4/CD8) в периферической крови составляет0.9- 2.7, с небольшими отклонениями в очень молодом и очень старом возрасте. Это отношение можетбыть сильно снижено при определенных болезнях, включая иммунодефицитные состояния, гиперчувствительность IV (замедленноготипа) и ВИЧ-инфекцию.

Г. Морфологическая идентификация субпопуляций Т-лимфоцитов: Т-лимфоциты и их подтипы морфологически не отличаются друг от друга или от В-лим- фоцитов и характеризуются присутствием антигенов, которые действуют как иммунологические маркеры. Эти антигены могут быть обнаружены специфическими моноклональными антителами (табл. 10.1). Использование этих антител при иммунофлюоресцентном или им- мунопероксидазном методе также позволяет выяснить локализацию различных Т-субпопуляций лимфоцитов в лимфоидной ткани.

В-лимфоциты

А. Распределение В-клеток в организме: В-лимфоциты развиваются в функциональном эквиваленте сумки Фабрициуса птиц (вероятно, в эмбриональном костном мозге у млекопитающих), проходя при этом сложный процесс, включающий в себя размножение и разделение на классы. Затем В-лимфоциты распрост-

Цитокины (лимфокины)¹

Таблица 10.3.

¹ Цитокины — биологически активные вещества типа гормонов местного действия, которые принимают участие в регуляции иммунного ответа и воспаления.

^г Стимуляторы колоний моноцитов и моноцитов/гранулоцитов

³ Интерфероны — группа разнообразных (a, b, g) веществ, обладающих антивирусной и антиопухолевой активностью

⁴ TNF: фактор некроза опухоли (а и b). Оба имеют ингибирующее и токсическое действие на многие клетки. TNFa также известен как кахектин.

⁵ TGF: трансформирующий фактор роста (а и b). Группа веществ, стимулирующих и ингибирующих рост.

раняются током крови в В-области периферической лимфоидной ткани. K этим областям относятся: 1) реактивные (вторичные или герминативные) центры фолликулов и синусы мозгового слоя лимфатическихузлов (30%лимфоцитов влимфатических узлах — В-клетки); 2) реактивные центры в фолликулах белой пульпы селезенки (40%селезеночныхлимфоцитов — В-клетки). Термин «первичный фолликул» используется для обозначения скопления В-клеток в лимфатических узлах или селезенке, которые не проявляют пролиферативной активности. Подобно Т-клеткам, В-клетки также постоянно циркулируют между лимфоидной тканью и периферической кровью,однако менееактивно. В-клетки составляют 10-20% процентов от общего числа лимфоцитов периферической крови.

Б. Трансформация В-клеток: после стимуляции специфическим антигеном В-лимфоциты трансформируются в плазматические клетки. Этот процесс идет стадийно, с образованием ряда промежуточных форм, формирующих реактивный (герминативный) центр фолликула. Плазматические клетки синтезируютиммуногло- булины (антитела), которые являются специфичными для антигена. Образование циркулирующих антител, специфичных для антигенов — основа приобретенного иммунитета,названного гуморальным иммунитетом.

В. Морфологическая идентификация В-клеток: плазматические клетки являются эффекторными (исполнительными) В-клетками. Плазмоциты имеютхарак- терное морфологическое строение (табл. 10.2). Плазмоциты имеют размеры 12-15 мкм в диаметре, базофильную цитоплазму (базофилия объясняется присутствием большого количества РНК, требуемой для синтеза иммуноглобулинов), в которой обнаруживается зона Гольджи, видимая как бледная область, расположенная рядом с ядром, расположенным эксцентрично; хроматин в ядре расположен в виде крупных глыбок по периферии (в виде «колеса телеги» или«циферблата»). Иммуноглобулины могутвыявляться в цитоплазме иммунологическими методами.

Другие В-лимфоциты могутбыть идентифицированы только иммунологическими, иммуноморфологическими и генетическими методами. Иммунофлюоресцентный или иммунопероксидазный методы, использующие антителакчеловеческому иммуноглобулину,об- наруживают присутствие поверхностного иммуноглобулина (на созревающих В-клетках) и цитоплазматического иммуноглобулина (в плазматических клетках). Также используются специфические моноклональные антитела, которые реагируют с В-клетками (табл. 10.1). Генетические методы, которые обнаруживают присутствие перестроенных генов иммуноглобулинов, могут также помочь идентифицировать В-лимфоциты.

«Нулевые» клетки (NK-клетки и К-клетки)

«Нулевые» клетки — это гетерогенная группалим- фоцитов, не обладающих способностью формировать Е-розетки (иммунологический тест, которые раньше использовался для идентификацииТ-лимфоцитов) и не несущие поверхностного иммуноглобулина (следовательно, немаркированные или «нулевые» клетки). Эта группа включает некоторые клетки, которые являются явно T- или В-клетками, что было недавно доказано генетическими методами и методом моноклональныхан- тител, однако обозначение этих клеток было оставле-

но. Популяция «нулевых» клеток представляет собой T- и В-клетки, находящиеся на ранних этапах дифференцировки, до появления большого количества маркеров на их поверхности. «Нулевые» клетки составляют 5-10%OT всехлимфоцитов периферической крови.

Некоторые «нулевые» клетки обладают цитотоксической активностью и названы естественными киллерами (NK-клетками); они могутразрушать некоторые чужеродные клетки, даже если организм никогда не встречался с данным антигеном. Другие (названные K- клетками) участвуют в разрушении клеток с помощью антител (антителозависимая клеточная цитотоксичность (ADCC — antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity)).

Имеются доказательства, что активность, которую проявляют NK-клетки и К-клетки,— это 2 различных функции одного типа клеток. NK клетки могут играть защитную роль при опухолевом процессе,устраняя потенциально неопластические клетки.