Иммуноферментные методы диагностики ремоделирования нервной ткани
Для повышения объективности оценки реактивности ткани спинного мозга в ответ на травму нами были разработаны способы количественной оценки процесів дегенерации и регенерации нервной ткани, а также ее ремоделирoвания в посттравматическом периоде у пациентов с повреждениями шейного отдела позвоночника.
Для оценки степени дегенерации нервной ткани в процессе ее ремоделирования в динамике нами oпределялись количественные значения содержания в сыворотке крови нейрoспецифических белков (pNF-H, MBP, anti-MAG), маркеров ремоделирования межклеточного матрикса (MMP-2, MMP-9, TIMP-1), про- (TNFtt, IL-Ιβ, IL-6) и противoвоспалительных (IL-4, IL-10) цитокинов.
В качестве иммунологических маркеров регенерации нервной ткани использовали определение следующих показателей: pNF-H (альтерация аксонов) и MMP-2, MMP-9, TIMP-1 (альтерация компонентов гематоспинномозгового барьера). На основании этих параметров нами был предложен рассчетный показатель - коэффициент повреждения (Кп) нервной ткани (1):
где:
Кп - коэффициент повреждения нервной ткани;
ММР-2 - концентрация матриксной металлопротеиназы-2;
ММР-9 - концентрация матриксной металлопротеиназы-9;
TIMP-1 - концентрация тканевого ингибитора матриксной металлопротеиназы-1; pNF-H - концентрация фосфорилированного нейрофиламента-Н;
«-» - отрицательное значение, отражающее дефицит основной массы ткани и межклеточного матрикса.
В качестве иммунологических маркеров регенерации нервной ткани рассматривали уровни MBP и anti-MAG в сыворотке крови (регенерация миелиновых волокон). На основании данных параметров нами также был предложен рассчетный показатель - коэффициент восстановления (Кв) нервной ткани (2):
где:
Кв - коэффициент восстановления нервной ткани;
MBP - концентрация MBP; anti-MAG - концентрация anti-MAG;
«+» - положительное значение, отражающее префицит основной массы ткани и межклеточного матрикса.
Для повышения точности оценки процессов дегенерации нервной ткани, развивающихся при ТБ спинного мoзга в условиях MARS мы исследовали содержание про- (TNFtt, IL-Ιβ, IL-6) и противoвоспалительных (IL-4, IL-10) цитокинов, учет которых позволил разработать поправочный коэффициент смешанного антагонистического ответа (Kmars) (3):
где:
Kmars - поправочный коэффициент смешанного антагонистического ответа;
IL-1 β - концентрация IL-1 β;
IL-6 - концентрация IL-6;
IL-4 - концентрация IL-4;
IL-10 - концентрация IL-10.
Полученные значения коэффициентов (формулы 1-3) рассчитывали как суммарное значение показателя состояния нервной ткани (Σ) в посттравматическом периоде следующим образом (4):
где:
Σ - суммарное значение показателя;
Кп - коэффициент повреждения;
Кв - коэффициент восстановления;
Kmars - поправочный коэффициент смешанного антагонистического ответа;
«±» - значение, усиливающее отрицательные или положительные значения суммарного показателя дегенерации нервной ткани Σ .
Значения суммарного показателя состояния нервной ткани Σ нами были оценены в динамике в основной группе пациентов (табл. 30).
Таблица 30 - Динамика суммарных показателей состояния нервной ткани у пациентов с осложненными повреждениями шейного отдела позвоночника
Согласно данным табл. 30 у больных основной группы состояние нервной ткани в остром и раннем периодах характеризовалось уменьшением явлений клеточной дегенерации и активацией внутриклеточной регенерации. Так, дегенерация нервной ткани имела наибольшую выраженность на 1-4-е сутки с момента травмы, затем происходило уменьшение суммарного показателя Σ на 7-е -14-е сутки в 1,08 раз (р1;2