Модели на основе введения 6-гидроксидофамина

6-ГДА - структурный аналог ДА, что объясняет его избирательный захват в ДА-ергические и норадренергические нейроны с помощью соответственно мембранного транспортера ДА (ДАТ) и транспортера норадреналина (Luthman et al., 1989).

Рис. 1. Механизм действия нейротоксинов (6-ГДА, МФТП, ротенон и паракват) на ДА-ергичес- кие нейроны (Schober, 2004).

АФК - активные формы кислорода, ВМАТ - везикулярный транспортер моноаминов, ДА-ер- гический нейрон - дофаминергический нейрон, ДАТ - мембранный транспортер дофамина, 6-ГДА

- 6-гидроксидофамин, ГЭБ - гематоэнцефалический барьер, МАО Б - моноаминоксидаза Б, МФП+

- 1-метил-4-фенилпиридиум ион, МФТП - 1-метил-4-фенил-1,2,3,6-тетрагидропиридин, синапт. везикула - синаптическая везикула

6-ГДА было показано нейропротекторное действие антиоксидантов после введения этого токсина (Hou et al., 1997). Действие 6-ГДА можно ограничить только ДА- ергическими нейронами, используя ингибитор обратного захвата норадреналина или вводя нейротоксин в области мозга, где в основном локализованы ДА-ергичес- кие нейроны - тела или аксоны, такие как ЧС или стриатум.

Для моделирования БП с помощью 6-ГДА чаще всего используют грызунов, особенно крыс. 6-ГДА не проникает через гематоэнцефалический барьер, поэтому его стереотаксически вводят в мозг - в боковые желудочки мозга, в 3-й желудочек, в большую затылочную цистерну мозга или непосредственно в ткань мозга (Hok- felt, Ungerstedt, 1973; Cadete et al., 1989; Sauer, Oertel, 1994).

Широко распространено моделирование БП путем стереотаксического введения токсина непосредственно в ткань мозга крысам. Наиболее часто используют введение в ЧС, где локализуются тела ДА-ергических нейронов, в стриатум - место проекции аксонов, и в медиальный пучок переднего мозга, где проходят их аксоны. В отличие от внутрижелудочкового введения, инъекции в структуры мозга приводят к унилатеральной дегенерации нейронов. Это позволяет использовать контрлатеральную сторону мозга как контроль. Однако следует помнить, что в ряде работ были показаны изменения и в контрлатеральной стороне после введения 6-ГДА, что объясняется незначительным перекрестом аксонов ДА-ергичес- ких нейронов (Schallert et al., 1983; Warenycia, McKenzie, 1987; Robinson, Whishaw, 1988; Schwarting, Huston, 1996; Kozlowski et al., 2004), такой способ введения также позволяет избежать афагии у животных, но при этом развиваются асимметричные моторные нарушения у крыс (Schallert et al., 2000), такие как поворот головы и отклонение хвоста в направлении поврежденной стороны, появляются стереотипные вращательные движения в ипсилатеральном по отношению к повреждению направлении, так называемая «вертячка».

Введение 6-ГДА в стриатум вызывает медленную ретроградную дегенерацию ДА-ергических нейронов, по крайней мере, в течение одного месяца (Sauer, Oertel, 1994; Przedborski et al., 2000), что дает возможность поиска лекарственных веществ с нейропротекторными свойствами. Деградация терминалей аксонов начинается уже через 1 час после введения 6-ГДА, а пик дегенерации тел нейронов приходится на период с 7 по 10 день. В ранних работах получены косвенные доказательства дегенерации нейронов по пути апоптоза - уменьшение степени деградации нигростриатной системы с помощью ингибиторов каспазы 3 (Jonsson, 1983; Cutillas et al., 1999; He et al., 2000). Однако в последних публикациях не удалось обнаружить активации каспаз после унилатерального введения 6-ГДА (Ebert et al., 2007). Введение 6-ГДА в медиальный пучок переднего мозга приводит к гибели нейронов по пути апоптоза (He et al., 2000; Zuch et al., 2000), а введение в ЧС приводит к гибели по неапоптотическому пути (Jeon et al., 1995). Также введение 6-ГДА в медиальный пучок переднего мозга или в ЧС вызывает более быструю и массивную гибель ДА-ергических нейронов, нежели в стриатум. Так, уже через 12 часов после введения 6-ГДА наблюдается гибель до 80% тел ДА-ергических нейронов с пиком через 72 часа (Faull, Laverty, 1969). Однако данный способ введения 6-ГДА приводит также и к гибели ДА-ергических нейронов в вентро-тегментальной области мозга, что соответствует поздней клинической стадии БП (Hokfelt, Ungerstedt, 1973; Smith et al., 2003).

Небольшие дозы 6-ГДА при введении как в желудочки мозга, так и в структуры мозга, вызывают незначительную гибель тел ДА-ергических нейронов и допороговое снижение ДА в стриатуме, имитируя изменение нигростриатной ДА-ерги- ческой системы на доклинической стадии БП, однако только по этому показателю (Abercrombie et al., 1990; Bergstrom, Garris, 2003; Ossowska et al., 2005).

2.1.