Методы исследований
2.2.1. Клинические методы обследований
Для диагностики АР использовали анкету «The Score for Allergic Rhinitis». Анкета основана на количественной системе подсчета в баллах, позволяющей выявить не только АР, но и некоторые особенности данного диагноза: сезонность, сенсибилизирующий фактор, тяжесть клинических, проявлений (40).
Интегральная бальная оценка АР основана на следующих
параметрах:
• Симптомы ринита, не связанные с ОРВИ и наблюдаемые в течение последнего года (чихание, ринорея, заложенность носа, зуд носа), - по 1 баллу за каждый симптом.
• Симптомы конъюнктивита, сопровождающие ринит (зуд, покраснение глаз), - по 2 балла за каждый симптом.
• Сезонность проявлений ринита (по календарю цветения для каждого региона) - по 1 баллу в каждый сезон цветения и по 2 балла при наличии круглогодичных симптомов ринита.
• Симптомы ринита, появляющиеся при контакте с пылью, пыльцой {по 2 балла}, шерстью животных (7 балл}.
• Положительный аллергоанамнез (наличие в прошлом каких-либо проявлений аллергии: острая крапивница как симптом пищевой аллергии, острые реакции на домашнюю пыль, шерсть животных, пыльцу трав) — по 2 балла.
• Выявленные ранее аллергические заболевания — nol баллу.
• Положительные скарификационные кожные пробы и/или IgE — антитела в сыворотке крови в прошлом — по 1 баллу.
• Отягощенная наследственность (наличие родственников, страдающих аллергическими заболеваниями) - 2 балла.
Суммарное количество баллов у пациентов с ринитами различного генеза колебалось от 0 до 29.
Бальная оценка тяжести АР была проведена на основании анкеты, разработанной Holm A.F., Fokkens W.J., Godthelp Т. и соавторами' (86). Учитывали следующие клинические проявления заболевания:
1. Заложенность носа (0 баллов - отсутствует; 1 балл - непостоянная, дыхание через нос свободное; 2 балла - дыхание через нос затруднено, пациент преимущественно дышит через рот; 3 балла - полная блокада носового дыхания).
2. Ринорея (0 баллов - отсутствует; 1 балл - незначительные выделения из носа; 2 балла - выделения из носа постоянные; 3 балла - обильные выделения из носа).
3. Чихание (0 баллов - отсутствует; 1 балл — единичные эпизоды; 2 - редкие приступы по 1-4 раза; 3 балла — частые приступы более 5 раз).
4. Зуд крыльев носа (0 баллов - отсутствует; 1 балл - непостоянный; 2 балла — постоянный; 3 балла - постоянный, интенсивный).
Таким образом, суммарное количество баллов по данной шкале оценки симптомов колебалось от 0 до 12.
Тяжесть течения АР, оцененную в 1-4 балла, считали легкой, в 5-8 баллов — среднетяжелой, в 9-12 баллов - тяжелой.
Сбор анамнестических данных проводили по специально разработанной тематической карте. Опрос больных включал:
- жалобы со слов родителей;
- когда впервые отметили их (жалобы) у ребенка;
- с чем связывают возникновение вышеперечисленных жалоб (симптомов);
- имеют ли данные симптомы какую-либо периодичность или присутствуют постоянно;
- есть ли признаки снижения или отсутствия симптомов в связи с переменой погоды или климата (смены окружающей среды, обстановки);
- какие препараты использовались с целью купирования симптомов;
- отмечают ли родители вышеназванные симптомы у ближайших родственников;
2.2.2.0ториноларингологические методы обследования
Клиническое обследование ЛОР-органов включало в себя осмотр лицевого скелета в целом, переднюю и заднюю риноскопию, фарингоскопию, отоскопию. Риноскопию проводили до и после предварительной анемизации слизистой оболочки полости носа 0,025% раствором називина.
При передней риноскопии оценивались расположение перегородки носа, состояние общих носовых ходов, состояние носовых раковин, определялся характер носового секрета и его локализация, состояние носового клапана. При задней риноскопии обследованных больных определялось состояние задних концов носовых раковин, устьев слуховых труб, степень развития и расположение аденоидной ткани в носоглотке.
Всем больным было проведено рентгенологическое обследование рентгенографии носоглотки и околоносовых пазух в боковой и в прямой проекциях соответственно (рентгеновский аппарат PHILIPS MEDIO 50 CP).
Bi гипертрофии глоточной миндалины мы различали 3 степени: I степень - аденоиды прикрывают верхнюю треть сошника, II степень- верхние две трети сошника и III степень- весь сошник. Обследование пациентов производилось в отделении радиологии Московского Научно-Исследовательского Института Педиатрии и Детской Хирургии Росздрава.
Всем детям до и после лечения проводили эндоскопическое исследование полости носа, которое выполнялось с применением жесткой волоконной оптики с углом зрения 0° и 30° фирмы Karl’ Storz (Германия). Предварительно проводили анемизацию слизистой оболочки полости носа 0,025% раствором називина и анестезию 10% раствором лидокаина. При эндоскопическом исследовании полости носа осматривали верхний, средний и нижний носовой ход, состояние верхних, средних и нижних носовых раковин, фиксировали наличие искривлений перегородки носа, наличие и характер* отделяемого в носовых ходах, задние концы нижних носовых раковин, состояние носоглотки, устьев слуховых труб, другие патологические изменения. При эндоскопическом осмотре носоглотки обращали внимание на аденоидные разрастания II и Н-Ш степени, отек задних концов нижних носовых раковин. Данный метод диагностики помогает решить вопрос, имеется ли истинная гипертрофия глоточной миндалины, или ее увеличение вызвано аллергическим воспалением. В последнем случае поверхность миндалины была рыхлой, а
слизистая оболочка имела бледно-серый цвет, и ее стекловидный отек больше напоминал внешний вид носовых полипов, чем обычной слизистой оболочки.
2.2.3. Аудиологическое обследование
Импедансную аудиометрию проводили при помощи клинического
импедансного аудиометра « МАІСО» Ш 24 (Германия). Полученные
данные интерпретировали по классификации J.Jerger (1970) в виде буквенного обозначения- кривых (А, В, С, D, Е). Кроме этого учитывали количественные показатели импедансометрии: градиент, акустический импеданс, акустический комплианс, порог слухового рефлекса.
2.2.4. Функциональные методы диагностики (передняя активная риноманометрия)
Дыхательную функцию оценивали с помощью аппарата Rhinometric (Дания), включающего в себя системы Rhinostream (риноманометрия).
и Rhinoscan (система ринометрии SRE 2000/2100, Интеракустик): Риноманометр одновременно регистрирует величину потока воздуха, проходящего через нос, измеряемую в куб. см/сек, и бародавление, измеряемое в Паскалях (Па). Это позволило автоматически измерять полный цикл вдоха и выдоха; раздельно1 проанализировать поток воздуха в каждой половине носа и рассчитать их соотношения. Результаты фиксировали и записывали в базу данных компьютера, распечатывались при помощи подключенного принтера. Методика проведения исследования заключалась в следующем: последовательно специальным адаптером, соответствующего диаметра (из трёх существующих вариантов), подключённым к датчику, закрывается одна половина носа, на область рта и носа накладывается герметичная силиконовая маска, больного просили дышать через нос. Полученные данные фиксировались в виде графика, затем компьютер обсчитывал и регистрировал усреднённый результат исследования.
2.2.5.Лабораторные методы
Клинический анализ крови:
Определение процентного содержания эозинофилов в периферической крови выполняли по методу, описанному в справочнике "Лабораторные методы исследования в клинике" под редакцией В.В. Меньшикова (78). Кроме этого, при необходимости проводили анализ свертывающей системы крови, биохимический анализ крови, общий анализ мочи.
Эксфолиативный цитологический анализ назального секрета:
Для получения назального секрета пациента просили выдуть содержимое полости носа на обезжиренное предметное стекло поочередно из обеих половин полости носа. Мазок высушивали при комнатной температуре и фиксировали в метиловом спирте в течение 10 мин. Препарат окрашивали раздельно: сначала водным раствором эозина К(1 г/л) в течение 10-15 секунд, затем водным раствором азура (1 г/л) в течение 10-15 минут: После каждого окрашивания препарат отмывали в дистиллированной воде. После просушивания мазок изучали под световым микроскопом с 90- кратным увеличением с иммерсией. В мазке подсчитывали не менее 200 клеточных элементов.
Определяли процентное содержание нейтрофильных и эозинофильных лейкоцитов, оценивали состояние клеточных элементов — изменения мембраны, цитоплазмы, ядра, а также морфологию эпителия (2,3,42,85).2.2.6. Аллергологические методы Скарификационные кожные пробы:
Кожное тестирование с основным^ спектром ингаляционных аллергенов проводили в условиях аллергологического кабинета совместно с сотрудниками лаборатории иммунологии, биохимии и микологии ФГУ НКЦ оториноларингологии Росздрава, заведующая лабораторией - д.м.н.,
профессор М.А.Мокроносова.
Постановку скарификационных кожных проб проводили на обработанной 70% этиловым спиртом коже внутренней поверхности предплечий, отступив на 5 см от лучезапястного сустава. Пробы ставили на расстоянии 3-5 см в шахматном порядке. В качестве положительного контроля использовали 0,01% раствор гистамина дигидрохлорида, в качестве отрицательного — тест
- контрольную жидкость.
При наличии проявлений контактного или атопического дерматита в области рук, постановку проб производили на коже спины.
Перед проведением кожного тестирования были учтены следующие противопоказания:
- выраженное обострение основного заболевания;
- острые интеркуррентные инфекционные заболевания;
- туберкулез и ревматизм в период обострения процесса;
- нервные и психические заболевания в период обострения;
- болезни сердца, печени, почек и системы крови в стадии декомпенсации;
- анафилактический шок в анамнезе;
- возраст до 3-х лет;
- период лечения системными стероидными гормонами и антигистаминными препаратами.
Кожные пробы принимали за положительные при размере волдыря не менее 5 мм и оценивали по размерам папулы и гиперемии по четырехбальной шкале.
Определение уровня общего IgE и IgE-антител к аэроаллергенам
в сыворотке крови:
Забор крови из локтевой вены проводили в процедурном кабинете с
соблюдением правил асептики и антисептики. Для отделения сыворотки кровь в количестве 5-8 мл помещали в чистую центрифужную пробирку и
центрифугировали- 10 минут при скорости 1000 оборотов в минуту.
Допускалось хранение полученных образцов і сыворотки при температуре 2- 8°С в течение 1-2 суток или при -20°С до 6 месяцев.Для определения IgE - АТ в сыворотках крови применяли тест - набор PolyCheck® (Milenia Biotec, Германия). Проводили определение IgE- АТ к ингаляционным аллергенам клещей домашней пыли, шерсти животных, пыльцы деревьев, пыльцы злаковых трав, пыльцы сорных трав.
Анализ выполняли, руководствуясь инструкцией производителя. На мембрану с сорбированными аллергенами наносили 400 мкл «старт - раствора», удаляли' через несколько- секунд путем встряхивания. Затем на мембрану наносили 400 мкл сыворотки крови и инкубировали в течение 45 мин на горизонтальном шейкере при частоте 120 встряхиваний в минуту. После этого восьмикратно отмывали мембрану фосфатным буферным раствором с твином (рН=7,4), наносили 400 мкл буфера и инкубировали на шейкере в течение 5 минут. Затем вновь восьмикратно' отмывали мембрану буферным раствором, добавляли 400 мкл меченных лигандом крысиных анти- IgE-AT и инкубировали 45 минут на шейкере. После чего снова проводили отмывку мембраны восьмикратно буферным раствором, наносили на! мембрану 400 мкл меченных ферментом антилигандов и инкубировали на шейкере 20 минут, вновь проводили отмывку, добавляли 400 мкл раствора субстрата и инкубировали в течение 20 минут на шейкере в темноте. Отмыв мембрану от раствора субстрата, давали ей высохнуть, и определяли содержание IgE-АТ в сыворотке крови (в кЕ/л) с помощью планшетного сканера и программного обеспечения Milenia BioCheck Image Software vl.2b. Для интерпретации полученных нами результатов пользовались следующей шкалой (таблицы 2- 4).
Таблица 2
Интерпретация результатов определения IgE-АТ в сыворотке крови
Концентрация IgE-AT в сыворотке (кЕ/л) | Класс реакци и | Трактовка результатов |
100 | 6 | Исключительно высокий уровень IgE-AT |
Таблица 3
Метод определения концентрации иммуноглобулинов методом радиальной иммунодиффузии в геле по Manchini G. ( Д.В. Стефании,
Ю.Е. Вельтищев, 1977); чувствительность метода 0,003 г/л белка
Возраст | IgG, г/л | IgA, г/л | IgM, г/л |
3-5 лет | 9,05 (5,0-15,0) | 0,82(1,2-2,75) | 1,69(0,5-3,8) |
6-8 лет | 10,2(6,6-14,25) | 1,28(0,6-2,45) | 1,9(0,6-5,0) |
9-12 лет | 12,1(7,2-19,2) | 1,28(0-2,5) | 1,83(0,8-5,0) |
Таблица 4
Концентрация IgE (мг/л) у здоровых детей в зависимости от возраста
Возраст | IgE (мЕ/мл) |
2 года | 9 |
3 года | 5 |
5 лет | 24 |
6-8 лет | 45 |
9 лет | 83 |
10 лет | 115 |
11 лет | 83 |
2.2.7. Микробиологические методы
Микробиологическое исследование назального секрета: „
Исследование микробиоценоза полости носа у больных АР и аденоидитом проводили в ФГУ Московском Научно- исследовательском Институте педиатрии и детской хирургии Росздрава иммунобактериологической лаборатории по методике В.В.Меньшикова (78).
2.2.8. Методы терапии больных АР Методы консервативного лечения:
С целью купирования отека слизистой и восстановления нормальной аэрации верхних дыхательных путей пациенты получали следующую терапию:
- местная ирригационная терапия (изотонический раствор хлорида натрия);
- системная антибактериальная терапия при наличии показаний, препаратом выбора являлся цефуроксим.
- назальный спрей флутиказона пропионат (НСФП).
Метод хирургического лечения:
Методом хирургического лечения являлась аденотомия, которую производили как под местной анестезией путем орошения слизистой оболочки носоглотки с раствором лидокаина 10%, так и под эндотрахеальным ингаляционным наркозом.
Общее обезболивание использовали у пациентов, страдающих функциональными и органическими заболеваниями нервной системы, логоневрозом, нейроциркуляторними дистониями, врожденными заболеваниями бронхолегочной системы и пороками развития носоглотки.
2.2.9. Статистические методы
Статистическую обработку количественных показателей проводили с помощью статистических формул программы Microsoft Excel версия 5а (для определения коэффициента корреляции, достоверности различий средних по критериям Стьюдента). Результаты исследований обработаны с помощью компьютерной программы «STATISTICA» 4.0 (Реброва О.Ю., 2002). Использовали также дисперсионный анализ, и непараметрические методы статистики (110).
Различие считали достоверным при р
Еще по теме Методы исследований:
- ЛЕКЦИЯМЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ОРГАНОВ ДЫХАНИЯ.
- з.5.1. Инструментальные методы исследования
- Методы исследования личности
- 5.5. Классификация методов аналитических исследований
- КЛАССИФИКАТОР МЕТОДОВ АНАЛИТИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ
- Методы исследования пищевода
- МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
- ЭЛЕКТРОФИЗИОЛОГИЧЕСКОЕ И УЛЬТРАЗВУКОВЫЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ЗРИТЕЛЬНОГО АНАЛИЗАТОРА
- Методы исследований
- РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
- Методы исследования.
- Методы исследования